蜂膠對炎性疾病和炎癥微環(huán)境的影響及其作用機制.pdf

1、炎癥是宿主系統(tǒng)受外界有害刺激時（如病原體、受損細胞或其他刺激物等）所產(chǎn)生的一系列保護性應答事件，它通過影響機體微環(huán)境中多種細胞與因子而參與調控機體多種生理、病理過程。盡管炎癥本身并不被認為是癌癥等復雜疾病的起始致病因素，但當前已有越來越多的研究發(fā)現(xiàn)炎癥在很多復雜疾病的發(fā)生發(fā)展進程中起重要作用。蜂膠是由蜜蜂(Apis mellifera)的工蜂采集植物樹脂等分泌物與其上顎腺、蠟腺等分泌物混合形成的膠粘性物質，也是一種歷史十分悠久的傳統(tǒng)天然

2、藥物，具有廣泛的藥理學活性和生物學作用，其良好的抗炎效果，也是蜂膠最早受到關注的藥理學活性之一?；诒緦嶒炇仪捌谘芯炕A，本實驗采用體內外炎癥模型，系統(tǒng)研究了蜂膠對炎癥性疾?。毦嗵钦T導小鼠肺損傷模型、硫酸葡聚糖誘導大鼠潰瘍性結腸炎模型）和炎癥微環(huán)境（腸道微環(huán)境、免疫微環(huán)境）的影響，主要研究結果如下:
　　1.中國楊樹型蜂膠及其植物來源楊樹芽提取物對細菌脂多糖誘導小鼠急性肺損傷的影響
　　中國楊樹型蜂膠及楊樹芽提取物的主

3、要植物化學成分存在相似性，定性定量結果表明中國楊樹型蜂膠提取物的酚酸類化合物含量、種類較楊樹芽提取物更為豐富，體外自由基清除能力也更強。通過細菌脂多糖誘導建立小鼠急性肺損傷模型，發(fā)現(xiàn)高劑量中國蜂膠提取物和楊樹芽提取物灌胃小鼠（100 mg/kg）均可抑制血清中炎癥因子（白介素-6，單核細胞趨化蛋白-1，腫瘤壞死因子-α和白介素-12p70）的產(chǎn)生并能顯著緩解肺部炎性損傷癥狀;
　　2.蜂膠對硫酸葡聚糖誘導大鼠潰瘍性結腸炎的影響

4、r>　　通過建立3％硫酸葡聚糖飲水誘導建立大鼠潰瘍性結腸炎模型，發(fā)現(xiàn)日糧中添加不同水平中國蜂膠（0.1％，0.2％和0.3％）對潰瘍性結腸炎的作用不盡相同，其中日糧中添加0.3％蜂膠對大鼠潰瘍性結腸炎的保護作用最為明顯，能顯著降低大鼠疾病活動指數(shù)，并能有效緩解結腸炎性病理改變。
　　3.中國蜂膠對腸上皮Caco-2細胞屏障功能影響及其機制
　　中國蜂膠能顯著提高Caco-2細胞單層跨膜電阻阻值，并能降低熒光黃滲透率。熒光定量

5、PCR結果表明蜂膠處理能提高緊密連接蛋白ZO-1和occludin的基因表達豐度，westernblot結果表明蜂膠能使腸道上皮Caco-2細胞AMPK-α、AKT.ERK1/2和p38蛋白發(fā)生磷酸化，采用特異性的蛋白抑制劑處理發(fā)現(xiàn)中國蜂膠對腸道屏障功能的調節(jié)作用受AMPK和ERK1/2信號通路所調節(jié)，而p38的激活則抑制了蜂膠對腸道屏障功能的促進作用。
　　4.中國蜂膠和巴西蜂膠對巨噬細胞免疫調節(jié)作用及其機制
　　利用巨噬

6、細胞體外炎癥實驗模型，探索了不同地理來源蜂膠對巨噬細胞的炎癥反應和對炎癥微環(huán)境相關信號通路的調控作用。結果發(fā)現(xiàn)，中國蜂膠和巴西蜂膠盡管化學成分存在顯著差異，但均能顯著抑制細菌脂多糖誘導小鼠巨噬細胞炎癥因子的表達與釋放，同時也能緩解細胞內活性氧(ROS)的累積。在調節(jié)細胞炎癥信號通路方面，報告基因結果表明蜂膠能顯著抑制炎癥過程中核心轉錄因子NF-κB的激活，但兩種蜂膠調節(jié)機制并不完全相同。巴西蜂膠能同時抑制脂多糖誘導巨噬細胞內IκB-α蛋

7、白的磷酸化和降解，中國蜂膠能抑制IκB-α蛋白的磷酸化，但對該蛋白炎癥過程中發(fā)生的降解并沒有顯著的抑制作用。通過構建HeLa-T6RZC穩(wěn)定細胞系進一步研究發(fā)現(xiàn)，蜂膠是通過抑制TRAF6依賴的泛素鏈的形成進而影響了TRAF6的泛素連接酶活性，從而抑制了NF-κB的激活。
　　綜上所述，本論文利用炎性疾病動物實驗模型和炎癥微環(huán)境細胞實驗模型系統(tǒng)研究了蜂膠的抗炎作用及其機制，為蜂膠在炎癥性疾病及輔助治療癌癥、心血管疾病、糖尿病等復雜疾