中國成人自身炎癥性疾病臨床和基因表型譜及自噬的作用初探.pdf

1、自身炎癥性疾病(Autoinflammatory diseases，AUIDs)是由固有免疫失調(diào)導致全身炎癥反應的疾病，包括單基因AUIDs和多基因AUIDs。中國漢族與國外其他種族、成人與兒童AUIDs在疾病譜、臨床表型譜和基因表型譜方面很可能存在不同，目前關(guān)于中國成人AUIDs的臨床和基礎(chǔ)研究極為缺乏。
　　目的：建立中國漢族成人AUIDs的前瞻性隊列，并與國外AUIDs、兒童AUIDs的疾病譜、臨床表型譜和基因表型譜對比。對

2、確診成人單基因和多基因AUIDs患者進行隨訪，建立應用客觀指標評價疾病嚴重程度的模型，觀察AUIDs治療前后疾病嚴重程度的變化，尋找導致療效不佳的獨立危險因素，并通過血清學指標檢測探尋新的反映疾病嚴重程度的指標。初步探究自噬在成人AUIDs發(fā)病機制中的可能作用，探索適合在臨床患者中檢測細胞自噬功能的實驗方法。
　　方法：就診時年齡≥16歲，符合2010年Kastner教授定義擬診AUIDs的患者納入前瞻性觀察隊列。收集患者入組及隨

3、訪的人口學信息、臨床資料、實驗室檢查及生物學標本，描述成人AUIDs患者臨床特點，并與國外AUIDs和兒童AUIDs進行疾病譜、臨床表型和基因表型的比較。采用Mann Whitney檢驗分析各炎癥指標與疾病活動性的關(guān)系。采用逐步回歸法進行多重線性回歸分析，建立由臨床癥狀、炎性指標及SF-36評分組成的評估疾病嚴重程度的模型。利用新建模型對AUIDs療效進行評估，采用二分類Logistic回歸分析尋找成人Still病(AOSD)傳統(tǒng)免疫抑

4、制劑治療效果欠佳的獨立危險因素。使用BD流式液相多重蛋白定量檢測技術(shù)進行血清多因子檢測。使用Western blotting方法對AUIDs患者WBC或外周血單個核細胞(PBMC)進行細胞自噬功能檢測。
　　結(jié)果：自2015年4月至2017年4月，北京協(xié)和醫(yī)院(PUMCH)風濕免疫科成人AUIDs中心共納入103例擬診AUIDs患者，26例(25.2％)診斷單基因AUIDs，61例(59.2％)診斷多基因AUIDs。單基因AUID

5、s中，中國成人NLRP12自身炎癥性疾病(NLRP12-AD)、Blau綜合征(BS)比例較國外成人高，而腫瘤壞死因子受體相關(guān)周期性綜合征(TRAPS)的比例較低。與兒童相比，家族性地中海熱(FMF)、高IgD綜合征(HIDS)所占比例較低，而NLRP12-AD在兒童中則尚未被發(fā)現(xiàn)。中國成人FMF的基因表型譜與日本相近，而與其他種族差異較大。與兒童相比，成人FMF乏力、結(jié)膜炎的發(fā)生率更高，而關(guān)節(jié)癥狀的發(fā)生率更低，且成人FMF無一例出現(xiàn)皮

6、疹;成人冷炎素相關(guān)周期性綜合征(CAPS)皮膚癥狀的發(fā)生率更低;成人周期性發(fā)熱-阿弗它口炎-咽炎-淋巴結(jié)炎(PFAPA)綜合征乏力、肌痛發(fā)生率更高，咽痛、腹痛的發(fā)生率更低。
　　87例單基因或多基因AUIDs中，大部分使用傳統(tǒng)免疫抑制劑治療，少部分應用生物制劑。使用活動性評分作為疾病緩解程度的指標，發(fā)現(xiàn)隊列中的患者經(jīng)過治療后疾病有明顯緩解。為更加精確的評估疾病嚴重程度，利用臨床癥狀個數(shù)、CRP和SF-36健康問卷總分3個客觀指標建

7、立評估疾病嚴重程度的模型，將利用該模型計算的結(jié)果命名為疾病嚴重程度指數(shù)(disease severity index，DSI)。利用DSI評價單基因和多基因AUIDs的療效，結(jié)果表明應用秋水仙堿和/或激素治療FMF可以使疾病得到有效緩解;傳統(tǒng)免疫抑制劑治療可以使大部分AOSD患者的病情得到有效緩解，仍有小部分患者效果不佳。通過探究導致療效差異的危險因素，發(fā)現(xiàn)女性、有關(guān)節(jié)癥狀、皮疹及淋巴結(jié)腫大者，對傳統(tǒng)治療的反應較好，男性、Hgb或RBC

8、水平較高的患者對傳統(tǒng)治療反應較差。使用Logistic回歸分析得到傳統(tǒng)治療療效欠佳的獨立危險因素為高RBC水平。檢測患者血清學標本的多種炎癥細胞因子，發(fā)現(xiàn)血清CD54水平和疾病嚴重程度具有良好的相關(guān)性。
　　建立適合在AUIDs患者中檢測細胞自噬功能的實驗方法，發(fā)現(xiàn)盡管差異無統(tǒng)計學意義，活動期AOSD患者PBMC的MDP誘導后自噬活化低于緩解期AOSD和健康對照。利用痛風患者新鮮提取的WBC，可以有效地檢測自噬功能。
　　結(jié)

9、論：本研究建立了中國漢族成人AUIDs的前瞻性隊列，并獲得了入組患者人口學基本信息、臨床資料及生物學標本。中國成人AUIDs與國外成人AUIDs或兒童AUIDs的疾病譜、基因表型譜和臨床表型譜均有不同。建立了利用臨床癥狀個數(shù)、CRP和SF-36健康問卷總分3個客觀指標評估疾病嚴重程度的模型。利用該模型評估抗炎和傳統(tǒng)非生物免疫抑制劑治療可以使大部分AUIDs患者病情得到緩解，并進一步找到導致傳統(tǒng)治療效果不佳的AOSD的獨立危險因素為高RB