CK19、P63在超脈沖CO2點陣激光修復(fù)兔耳淺表性瘢痕中的表達(dá)及影響因素的實驗研究.pdf

1、目的：觀察超脈沖CO2點陣激光 Active FX、Deep FX治療兔耳淺表性瘢痕的創(chuàng)面愈合情況并比較濕性創(chuàng)面護(hù)理技術(shù)和傳統(tǒng)外科創(chuàng)面護(hù)理技術(shù)，創(chuàng)面愈合的差異性。研究CK19、P63在兔耳淺表性瘢痕點陣激光修復(fù)中的表達(dá)及不同創(chuàng)面護(hù)理技術(shù)對它們的影響，為臨床采用超脈沖CO2點陣激光治療瘢痕、尋找表皮干細(xì)胞參與瘢痕修復(fù)的證據(jù)。
　　方法：選取新西蘭大白兔20只，在兔耳腹側(cè)面制作邊長為1.5cm的正方形全層皮膚及軟骨膜缺損創(chuàng)面，每只兔耳

2、2個創(chuàng)面，共計80個創(chuàng)面，建立兔耳淺表性瘢痕模型。激光治療分為兩組: UltraPulse CO2 Fractional(超脈沖CO2點陣)激光Active FX治療組和UltraPulse CO2 Fractional(超脈沖CO2點陣)激光Deep FX治療組;激光治療后創(chuàng)面修復(fù)分為兩組：傳統(tǒng)絡(luò)合碘治療方法組和濕潤燒傷膏治療方法組。每天觀察創(chuàng)面愈合情況，記錄每個創(chuàng)面的愈合時間；收集治療前、治療后即刻、1天、4天、7天、14天的瘢痕組

3、織標(biāo)本作病理組織切片，行HE染色鏡下觀察，并采用免疫組化檢測皮膚干細(xì)胞標(biāo)志分子角蛋白19（cytokeratins CK19）、轉(zhuǎn)錄因子P63的表達(dá)，分析超脈沖CO2點陣激光兩種不同模式和兩種創(chuàng)面修復(fù)方法對CK19、P63的影響。
　　結(jié)果：⑴大體觀察：絡(luò)合碘組Active FX、Deep FX模式治療后第2~3天創(chuàng)面開始干燥結(jié)痂、第9~10天痂皮開始脫落、第14天創(chuàng)面愈合，瘢痕較治療前平整，顏色變淺；濕潤燒傷膏組Active F

4、X模式治療后創(chuàng)面濕潤，第2~3天創(chuàng)面可見散在點狀結(jié)痂，第5~6天點狀痂皮脫落,Deep FX模式治療后創(chuàng)面未見明顯結(jié)痂，治療后第6~7天創(chuàng)面上皮化愈合。點陣激光Active FX模式治療：絡(luò)合碘組創(chuàng)面愈合時間為（13.7±0.65）天，濕潤燒傷膏組創(chuàng)面愈合時間為（10.4±0.80）天，組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；點陣激光Deep FX模式治療：絡(luò)合碘組創(chuàng)面愈合時間為（9.4±0.28）天，濕潤燒傷膏組創(chuàng)面愈合時間為（7.5±

5、0.62）天，組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；Active FX模式和 Deep FX模式治療創(chuàng)面愈合時間對比，組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。⑵病理組織學(xué)觀察：膠原纖維束較治療前排列整齊，纖維束呈均質(zhì)性紅染，纖維細(xì)胞少，瘢痕組織內(nèi)血管少。⑶免疫組化觀察：Active FX、Deep FX模式治療后即刻創(chuàng)緣無CK19、P63表達(dá)，24小時后CK19、P63表達(dá)，濕潤燒傷膏組治療后第4天CK19、P63表達(dá)增多，第7天達(dá)到高峰

6、，第14天逐漸減少；絡(luò)合碘組治療后第4天CK19、P63表達(dá)達(dá)到高峰，第7天和第14天減少。Active FX模式治療：濕潤燒傷膏組CK19、P63強陽性表達(dá)率（70％）明顯高于絡(luò)合碘組（40%、42.5%）；Deep FX模式治療：濕潤燒傷膏組CK19、P63強陽性表達(dá)率（62.5%、75%）明顯高于絡(luò)合碘組（35%、47.5%）組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；Active FX和 Deep FX治療模式之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。<

7、br>　　結(jié)論：①兔耳淺表性瘢痕內(nèi)有表皮干細(xì)胞的存留。②點陣激光（Active FX和Deep FX）兩種治療模式能對淺表性瘢痕形成微損傷，用濕性醫(yī)療技術(shù)對治療創(chuàng)面進(jìn)行修復(fù)，比傳統(tǒng)絡(luò)合碘修復(fù)更加保護(hù)表皮干細(xì)胞，促進(jìn)創(chuàng)面原位再生修復(fù)。同時，創(chuàng)面修復(fù)過程中，Deep FX模式治療后創(chuàng)面愈合比Active FX模式快。③通過CK19、P63陽性表達(dá)的變化，可以認(rèn)為表皮干細(xì)胞在淺表性瘢痕修復(fù)過程中起重要作用。④Active FX和Deep FX