泛素羧基末端水解酶在卵母細(xì)胞成熟過程中作用機(jī)制的初步研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、為了探討影響卵母細(xì)胞成熟潛能的原因,利用針對多種卵母細(xì)胞蛋白的單抗,分別進(jìn)行卵母細(xì)胞內(nèi)顯微注射實(shí)驗(yàn)以分析其阻斷孕酮誘導(dǎo)的卵母細(xì)胞成熟的生物效應(yīng),結(jié)果表明一種分子量為28kDa的蛋白(p28)與GVBD調(diào)節(jié)有關(guān);于是克隆了p28基因的cDNA全長.同源性比較發(fā)現(xiàn),p28屬于泛素羧基末端水解酶(ubiquitin carboxyl-terminalhydrolase,UCH)家族,和UCH L1的親緣關(guān)系最近.該文在過去的工作基礎(chǔ)上進(jìn)一步研

2、究了p28在卵母細(xì)胞成熟過程中的作用機(jī)制.在大腸桿菌(DE3)中表達(dá)了谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶融合蛋白(GST-p28),并用凝血酶切下p28部分;通過用針對天然p28的單克隆抗體檢測,發(fā)現(xiàn)重組表達(dá)的GST-p28和空載體表達(dá)的GST都未發(fā)生明顯的降解,適宜于p28的活性鑒定實(shí)驗(yàn).卵母細(xì)胞的免疫組化實(shí)驗(yàn)表明,在各期卵母細(xì)胞中都含有p28,而且在濾泡細(xì)胞中也存在p28的高表達(dá).隨著卵母細(xì)胞的生長,p28在核周圍有所聚集.蟾蜍p28除了以不依賴其UC

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