黃秋葵葉多糖的分離純化、初步表征及其抗氧化活性研究.pdf

1、黃秋葵（Okra，HibiscusesculentusL．）別名秋葵、羊角豆，屬錦葵科秋葵屬一年生藥食兩用草本植物。黃秋葵全身是寶，根、莖、葉、花、果皆可食用，既是營(yíng)養(yǎng)豐富的蔬菜，又有藥用保健效果。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)于黃秋葵的開發(fā)利用主要是它的果實(shí)和種子，黃秋葵葉作為廢棄物丟棄田間或作為肥料使用，造成了資源的極大浪費(fèi)。因此，本論文系統(tǒng)的分析黃秋葵葉的營(yíng)養(yǎng)成分，研究黃秋葵葉水提多糖各個(gè)組分的結(jié)構(gòu)特征及體外抗氧化活性，主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:

2、r>　　 1、黃秋葵葉成分分析。采用國(guó)標(biāo)法和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)方法對(duì)黃秋葵葉進(jìn)行基本成分分析，結(jié)果表明黃秋葵葉中水分含量為6.55％，灰分含量為14.32％，總糖含量為11.27％，粗蛋白含量為25.77％，粗脂肪含量為2.12％，黃酮含量為1.27％，多糖含量為4.39％。黃秋葵葉粗脂肪中主要成分有6種:葉綠醇含量為74.32％，9，12，15-十八碳三烯酸甲酯含量為5.38％，9，12-十八碳二烯酸甲酯含量為3.75％，十六烷酸甲酯含量為3

3、.36％，6，10，14-三甲基-2-十五烷酮含量為2.84％，7，11-二烯十六酮含量為0.96％。黃秋葵葉中含Na、K、Ca、Mg、Se、Zn、Fe、Mn等微量元素，其中K含量最高，為1143.374mg/100g。黃秋葵葉中氨基酸種類豐富，其中賴氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、甲硫氨酸、蘇氨酸、亮氨酸為人體必需氨基酸。黃秋葵葉富含多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，具有很好的研究和應(yīng)用價(jià)值。
　　 2、水提黃秋葵葉多糖的分離純化。黃秋葵葉多糖經(jīng)三氯乙酸

4、脫蛋白，DEAE-52纖維素和葡聚糖凝膠柱分離得到2個(gè)黃秋葵葉多糖組分RPS-11和RPS-22。各組分多糖在HPLC圖譜上呈單一對(duì)稱峰，表明多糖各組分為均一多糖組分。
　　 3、多糖各組分的分子量和單糖組成測(cè)定。采用高效液相色譜法和GC-MS法測(cè)定各組分多糖的分子量和單糖組成，結(jié)果表明，RPS-11和RPS-22的分子量分別為191778和1560631。RPS-11組分由D-阿拉伯糖，木糖，D-葡萄糖，D-甘露糖，半乳糖組成

5、，其摩爾比為D-阿拉伯糖∶木糖∶D-葡萄糖∶D-甘露糖∶半乳糖=10.72∶11.47∶1∶1.41∶12.81;RPS-22組分由D-阿拉伯糖，木糖，D-甘露糖，半乳糖組成，其摩爾比為D-阿拉伯糖∶木糖∶D-甘露糖∶半乳糖=7.96∶1.26∶1∶6.60。
　　 4、黃秋葵葉多糖各組分結(jié)構(gòu)的初步表征。運(yùn)用紫外光譜(UV)、紅外光譜(IR)、核磁共振(NMR)、原子力顯微鏡(AFM)、圓二色譜(CD)及剛果紅實(shí)驗(yàn)等現(xiàn)代分析方法

6、和理化分析手段對(duì)多糖組分RPS-11和RPS-22進(jìn)行表征。IR結(jié)果表明，各組分多糖均具有多糖的特征吸收峰;NMR結(jié)果表明各組分多糖結(jié)構(gòu)中即存在α糖苷鍵構(gòu)型;原子力顯微鏡觀察結(jié)果表明各多糖組分分子間相互纏繞，呈規(guī)則團(tuán)聚狀;圓二色譜結(jié)果表明，在不同的外界條件下（處理溫度、pH值、加入Ca2+離子、6mol/L的變性劑Urea和硼酸），各組分的CD譜圖發(fā)生顯著變化，表明外界條件的改變可影響其立體構(gòu)象和非對(duì)稱性;剛果紅實(shí)驗(yàn)證明，RPS-11和

7、RPS-22不具有三螺旋立體構(gòu)型。
　　 5、黃秋葵葉多糖的抗氧化活性研究。黃秋葵葉粗多糖和純化后各組分對(duì)四種自由基(·OH、DPPH·、ABTS+、O2-)均有一定的清除作用。對(duì)于DPPH·，在濃度為2500μg/mL時(shí)，RPS、RPS-11和RPS-22的清除率分別為76.62％、38.85％和28.43％;對(duì)于·OH，在濃度為2500μg/mL時(shí)，RPS、RPS-11和RPS-22的清除率分別為60.95％、39.39％和