黃芪多糖的分離純化及體外抗氧化活性研究.pdf

1、目的：黃芪(Astrgalus membranaceus)是傳統(tǒng)中藥材，具有多種藥理學(xué)活性，包括增強機體的免疫功能，增強心功能、降血壓、降血糖、抗應(yīng)激、抗腫瘤、抗病毒、抗輻射、抗氧化等多種藥理活性。黃芪具有多種藥效成分，其中黃芪多糖為黃芪主要的藥效成分之一日益引起人們的關(guān)注。已有的文獻表明，黃芪多糖能夠有效的提高小鼠體內(nèi)的GSH-PX活力，從而有效的抗氧化而延緩衰老。這提示我們黃芪多糖有可能具有多種抗氧化活性，但是目前對于黃芪多糖的體外

2、抗氧化活性的研究并未有深入的研究報道。本實驗論文以黃芪為原料分離純化黃芪多糖級份，并對其體外抗氧化活性及機制進行初步研究，以期為黃芪多糖抗氧化的臨床應(yīng)用提供一定的理論基礎(chǔ)。
　　 方法：黃芪經(jīng)水煮醇沉，反復(fù)凍融，乙醇沉淀，常規(guī)干燥得黃芪粗多糖crudeAstrgalus membranaceus polysaccharides(cAMPS)。cAMPS經(jīng)鏈霉菌蛋白酶酶解、Sevag法脫蛋白、DEAE-纖維素離子交換柱層析，Sep

3、hacryl S-200凝膠柱層析純化得多糖級份AMPSA-a，AMPSA-b，AMPSA-c和AMPSB-d。采用DPPH氧自由基、鄰苯三酚自氧化法和Fenton反應(yīng)，評價黃芪多糖級份的抗氧化能力。
　　 結(jié)果：高效液相色譜(HPLC)分析，結(jié)果表明黃芪多糖級份AMPSA-a，AMPSA-b，AMPSA-c和AMPSB-d均為均一級份，其分子量分別為134.9，69.4，61.5和46.1kDa；氣相色譜(GC)分析結(jié)果表明，

4、不同多糖級份的單糖組成均有所不同，但各級分均主要由甘露糖(Man)、半乳糖(Gal)和葡萄糖(Glc)以不同的摩爾比構(gòu)成?？寡趸钚詸z測顯示，黃芪多糖級份都能夠有效的清除DPPH、過氧陰離子和羥自由基，而且各級份的抗氧化活性具有濃度依賴性。在清除1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH)自由基活性方面：當(dāng)多糖濃度達到8mg/ml時，AMPSB-d，AMPSA-b，AMPSA-a和AMPSA-c對DPPH自由基

5、的清除率分別達到87.2％，65.3％，58.6％和55.4％。在清除超氧陰離子活性方面：當(dāng)濃度達到8mg/ml時，AMPSA-a，AMPSA-b，AMPSA-c和AMPSB-d的清除能力分別為32.4％，41.2％，42.3％和45.6％。在清除羥自由基活性方面：當(dāng)濃度達到8mg/ml時，AMPSA-a，AMPSA-b，AMPSA-c和AMPSB-d的清除能力分別為32.4％，38.6％，35.1％和39.6％，各級份表現(xiàn)出較為接近的