窒息死大鼠腦組織iNOS的表達(dá)及法醫(yī)學(xué)意義.pdf

1、背景及目的：機(jī)械性窒息死是兇殺案件中最多見的死因之一，大多數(shù)案件可通過現(xiàn)場(chǎng)勘驗(yàn)、尸體內(nèi)外部征像可確定機(jī)械性窒息死。但少數(shù)案件現(xiàn)場(chǎng)遭受破壞或痕跡不清，尸體內(nèi)外部無特異征象，難以判定為機(jī)械性窒息死。根據(jù)機(jī)械性窒息的機(jī)制，腦是受到損傷最為嚴(yán)重的內(nèi)部器官，且死后腦組織完整不易受到破壞。檢測(cè)某些物質(zhì)在機(jī)械性窒息死腦組織中的特異性變化，為推斷機(jī)械性窒息死提供一定科學(xué)依據(jù)。 iNOS是一氧化氮合酶的一種亞型，在生理狀態(tài)下不表達(dá)或微量表達(dá)；當(dāng)機(jī)

2、體受到炎癥、缺血缺氧、損傷、紫外線等刺激后，能在相應(yīng)病變的組織或器官大量表達(dá)，并呈一定的時(shí)間規(guī)律性。本實(shí)驗(yàn)主要研究大鼠窒息死組與其它死亡組腦組織中iNOS的表達(dá)規(guī)律，并探討其在機(jī)械性窒息死因推斷上的法醫(yī)學(xué)意義。 方法：1、動(dòng)物模型：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來源于重慶醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心飼養(yǎng)的健康清潔的SD大鼠80只，按照隨機(jī)的原則將大鼠分為機(jī)械性窒息死亡組、失血性休克死亡組、腦挫裂傷死亡組及斷頸死亡組。大鼠頸部放入尼龍繩的活套內(nèi)，背對(duì)活結(jié)，依靠

3、大鼠自身重量使活套拉緊，造成頸部壓迫窒息死亡模型；用10g砝碼從20CM高度，在導(dǎo)管內(nèi)自由落體垂直打擊硬腦膜，建立腦挫裂傷死亡模型；分離出雙側(cè)頸動(dòng)脈，剪斷放血至休克死亡模型；用一手拇指和食指用力往下按住鼠頭，另一只手抓住鼠尾，用力向后上方拉動(dòng)，造成脊髓橫斷致斷頸死亡模型；2、取材：在各組死后不同時(shí)間點(diǎn)在大腦中部作橫切面切取0.4CM腦組織；3、對(duì)所取材腦組織石蠟切片進(jìn)行HE染色光鏡觀察：4、采用免疫組織化學(xué)染色法進(jìn)行iNOS染色；5、使

4、用SPSS 13.0軟件包對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果：各組Oh的染色和同組各時(shí)段相比陽性染色稍底，同一組染色結(jié)果在(6h、12h、24h)各時(shí)間點(diǎn)上沒有顯著染色差別，機(jī)械性窒息死亡組在大腦灰質(zhì)神經(jīng)元胞漿內(nèi)染色深，呈明顯棕黃色，基本上累及整個(gè)視野所有神經(jīng)元的胞漿與失血性休克死亡組和腦挫裂傷死亡組及斷頸死亡組有顯著染色差別；失血性休克死亡組和腦挫裂傷死亡組神經(jīng)元胞漿內(nèi)染色較深，在整個(gè)視野中大部分的神經(jīng)元胞漿受累及，兩組間無明顯