經(jīng)血來源的間充質干細胞(MenSCs)在急性肺損傷(ALI)治療中作用的研究.pdf

1、間充質干細胞是一種來源于中胚層的成體干細胞，具有自我更新和多向分化潛能等特點，可以在再生醫(yī)學領域發(fā)揮重要的作用。經(jīng)血來源的間充質干細胞(MenSCs)是間充質干細胞中的一員，主要從女性月經(jīng)血中提取，具有獲取方便，安全無毒副作用等優(yōu)點。相較于其他來源的間充質干細胞，MenSCs沒有倫理及創(chuàng)傷方面的困擾，且能不斷從同一志愿者獲得大量相同遺傳背景的細胞。目前，MenSCs已經(jīng)被用于心肌梗死、Ⅰ型糖尿病等多種疾病的治療研究。許多感染性疾病如H7

2、N9，敗血癥及一些細菌尤其是Gram-的感染均可以引起急性肺損傷，然而，目前尚未發(fā)現(xiàn)MenSCs在急性肺損傷(ALI)方面的應用。本課題主要研究MenSCs在ALI的生物治療中的作用。
　　在本研究中，我們首先對MenSCs的進行了驗證，發(fā)現(xiàn)分離的細胞呈梭狀，表達CD29，CD44，CD73，CD90，CD105，不表達CD34，CD45以及CD11b，CD14，CD19，CD79a，CD117和HLA-DR分子，符合國際細胞治療

3、學會制定的MSCs標準，為MSCs中的一員。同時我們證實了MenSCs具有良好的體外增殖能力，可以進行成骨成脂分化，具有多向分化能力。此外，我們還發(fā)現(xiàn)MenSCs可以表達CD140b，CD194，CD221，及CD184等趨化因子或者具有趨化能力的相關因子的受體，可以在多種細胞因子的刺激下進行遷移，發(fā)揮靶向治療的作用。
　　接著，我們探討了MenSCs在治療ALI中的作用。在體外實驗中，我們發(fā)現(xiàn)MenSCs可以向暴露于LPS的肺支

4、氣管上皮細胞BEAS-2B遷移，并保護其活性，減少細胞凋亡。同時，我們在體外對MenSCs進行了誘導，發(fā)現(xiàn)誘導后的細胞成扁平的上皮樣形狀，并表達SPB，SPC和SPD等肺表面活性蛋白。在LPS誘導的ALI模型小鼠體內，我們用X線和病理組織切片證實MenSCs可以緩解小鼠肺部炎癥癥狀，減少損傷。而肺干/濕比和β-catenin蛋白表達的升高及支氣管肺泡灌洗液(BALF)總蛋白的下降則提示著MenSCs移植后小鼠肺通透性的改善。我們對BAL

5、F中炎性細胞，MPO檢測進一步驗證了MenSCs抑制肺部炎癥的作用。同時，我們還發(fā)現(xiàn)MenSCs可以提高PCNA的表達量，減少Caspase-3的表達量，促進損傷肺的修復。
　　最后，我們探討了MenSCs治療急性肺損傷的可能機制。我們發(fā)現(xiàn)，在MenSCs移植后，小鼠BALF，血清及肺實質中抑炎癥因子IL-10，TGF-β表達升高，促炎癥因子IL-1β和IL-6表達降低，表明MenSCs可能是通過免疫調節(jié)的作用來抑制炎癥。同時，我