脂肪來源間充質(zhì)干細胞在周圍神經(jīng)損傷修復中的研究.pdf

1、目的：采用酶消化法進行大鼠脂肪來源干細胞的體外培養(yǎng)，并鑒定獲得的干細胞，研究脂肪來源干細胞的獲取途徑及培養(yǎng)方法并為其體外增殖培養(yǎng)提供參考依據(jù)。
　　方法：取4～6周SD大鼠腹股溝處脂肪組織，置于D-Hank's液沖洗凈后剪成8mm3左右組織塊。將組織塊置于0.1％Ⅰ型膠原酶消化組織塊30min，用70μm孔徑的篩網(wǎng)過濾獲得消化液體，未消化完全的組織塊繼續(xù)置于0.1％Ⅰ型膠原酶消化30min。將獲得的消化液在1500rpm中離心7分

2、鐘，棄上清，用含有10％FBS的DMEM中培養(yǎng)，24小時后換液以除去未貼壁的細胞。采用CCK-8繪制細胞生長曲線，流式細胞儀檢測脂肪干細胞表面標志物。
　　結果：培養(yǎng)的細胞均具有典型的干細胞形態(tài)特征，增殖速度較快，培養(yǎng)第3天即可傳代，并且保持較高的增殖速度。脂肪干細胞標志物CD29、CD44、CD54、CD105呈陽性表達，造血干細胞標志物CD34、CD45陰性表達。
　　結論：利用酶消化法可以迅速獲取脂肪來源間充質(zhì)干細胞，