炎癥因子在低溫惡化心力衰竭中的作用及EPO的保護(hù)機(jī)制.pdf

1、目的:
　　 探討炎癥因子在低溫惡化心力衰竭中的作用及促紅細(xì)胞生成素(hypothermia,EPO)的保護(hù)機(jī)制。
　　 方法:
　　 雄性SD大鼠120只,2～3月齡,體重240～260g,隨機(jī)分2組,分別為①對(duì)照組(A組)10只:②阿霉素(adriamycin,ADR)組110只；ADR組均予腹腔注射ADR制作大鼠心衰模型(2.5mg·kg-1·d-1,2次/周,連續(xù)5周),A組予腹腔注射同體積的生理鹽水(2

2、次/周,連續(xù)5周)。后行經(jīng)胸壁超聲心動(dòng)圖(transthoracic echocardiography,TTE)測定心功能,判斷心衰模型是否建立成功。再將ARD組中造模成功存活下的76只大鼠按照隨機(jī)原則分為①常溫心衰組(B組)19只；②低溫心衰組(C組)19只；③EPO常溫心衰組(D組)19只；④EPO低溫心衰組(E組)19只。第6周,D、E組腹腔注射EPO(4000IU·kg-1·d-1,連續(xù)4天)；A、B、C組均予腹腔注射同體積的生

3、理鹽水(1次/天,連續(xù)4天)；第7周將C、E組大鼠放置于氣候箱中(4℃,4小時(shí)/天,連續(xù)4天),A、B、D組溫度與外界溫度相同,整個(gè)過程重復(fù)4天。實(shí)驗(yàn)過程中定期觀察大鼠的精神狀態(tài)及死亡情況,實(shí)驗(yàn)第7周末(即將C、E組從氣候箱中取出當(dāng)天)行心臟彩超測定心功能及終止實(shí)驗(yàn)。心臟標(biāo)本常規(guī)HE染色觀察心室肌病理變化,免疫組化法觀測心室肌組織中炎癥因子IL-6、IL-1β、TNF-α的表達(dá)水平、實(shí)時(shí)熒光定量PCR法測定心室肌組織中炎癥因子IL-6、

4、IL-1β、TNF-αmRNA表達(dá)量。
　　 結(jié)果:
　　 在腹腔注射ADR誘導(dǎo)建立心衰模型過程中,大鼠出現(xiàn)阿霉素中毒的表現(xiàn),且死亡34只；A組未見上述中毒癥狀及死亡情況；心衰造模成功后,C組在放置低溫氣候箱過程中死亡4只,E組死亡1只。
　　 (1)心功能水平:與A組相比,其余四組經(jīng)ADR處理后,LVEDD、LVESD增加(p<0.05),LVEF、FS降低(p<0.05)；與B組相比,C組LVEDD、LVES

5、D增加(p<0.05),LVEF、FS值增加(p<0.01),D組LVEF、FS值下降(p<0.01),LVEDD、LVESD減小(p<0.01)；與D組相比,E組LVESD增加(p<0.01),LVEF、FS值下降(p<0.01),上述結(jié)果顯示低溫能進(jìn)一步使心功能惡化,EPO可改善心衰大鼠心功能。
　　 (2)HE染色:光鏡下可見對(duì)照組大鼠心肌細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)基本正常,其余四組心肌組織內(nèi)可見不同程度的少量炎性細(xì)胞浸潤、間質(zhì)充血水腫

6、、心肌細(xì)胞玻璃樣變性及壞死。與常溫心衰組相比,低溫心衰組玻璃樣變性及壞死更明顯；EPO常溫心衰組上述改變較常溫心衰組輕。
　　 (3)免疫組化:光鏡下可見心肌細(xì)胞胞漿內(nèi)棕黃或棕褐著色。與A組相比,其余四組心肌組織內(nèi)IL-6、IL-1β、TNF-α陽性細(xì)胞百分比增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與B組相比,C組心肌組織IL-6、IL-1β、TNF-α陽性細(xì)胞百分率增高,D組心肌組織IL-6、IL-1β、TNF-α陽性細(xì)胞百分

7、率下降,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與D組相比,E組心肌組織IL-6、IL-1β、TNF-α陽性細(xì)胞百分率下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 (4)基因表達(dá):與A組相比,其余四組心衰大鼠心室肌組織IL-6、IL-1β、TNF-α mRNA表達(dá)量上調(diào),差異有顯著意義(p<0.01；與B組相比,C組心衰大鼠心室肌組織IL-6、IL-1β、TNF-α mRNA表達(dá)上調(diào),差異有顯著意義(p<0.01),D組IL-6、

8、IL-1β、TNF-α mRNA表達(dá)下調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與D組相比,E組IL-6、IL-1β、TNF-α mRNA表達(dá)上調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 (1)低溫促使心衰大鼠心功能進(jìn)一步惡化,其機(jī)制之一可能為低溫環(huán)境刺激心衰大鼠心肌組織炎癥反應(yīng)加重。
　　 (2)EPO調(diào)節(jié)IL-6、IL-1β、TNF-α的轉(zhuǎn)錄水平,從而抑制炎癥反應(yīng),達(dá)到改善及拮抗低溫惡化心衰大鼠心