栝樓桂枝滴丸的研制及質(zhì)量評(píng)價(jià)研究.pdf

1、目的:確定栝樓桂枝滴丸的最佳制備工藝，并建立質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，評(píng)價(jià)其中樞神經(jīng)保護(hù)作用。
　　方法:1.純化工藝研究:通過(guò)動(dòng)態(tài)吸附法結(jié)合MTT法優(yōu)選最佳樹(shù)脂種類;采用單因素試驗(yàn)，對(duì)影響大孔樹(shù)脂純化栝樓桂枝湯中芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、肉桂酸、6-姜酚、甘草苷、甘草酸和甘草素7種指標(biāo)成分的工藝進(jìn)行優(yōu)化，確定最佳純化工藝。2.有機(jī)殘留物檢測(cè):以正己烷、苯、甲苯和二甲苯為指標(biāo)，建立檢測(cè)大孔樹(shù)脂有機(jī)殘留物的GC法，并在此基礎(chǔ)上測(cè)定栝樓桂枝湯經(jīng)大孔樹(shù)脂

2、純化后有機(jī)殘留物的含量。3.制備工藝研究:以料液粘稠度、滴制難易程度和滴丸外觀質(zhì)量為考察指標(biāo)，通過(guò)單因素試驗(yàn)優(yōu)選基質(zhì)種類和藥物-基質(zhì)比例;再以滴速、滴距、料液溫度和冷凝溫度為自變量，滴丸的圓整度、丸重變異系數(shù)和溶散時(shí)限的綜合評(píng)分為因變量，采用正交試驗(yàn)法優(yōu)選栝樓桂枝滴丸的最佳制備工藝。4.質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立:以栝樓桂枝滴丸中芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、肉桂酸、6-姜酚、甘草苷、甘草酸和甘草素7種成分為指標(biāo)，運(yùn)用HPLC法，建立栝樓桂枝滴丸的含量測(cè)定方

3、法;采用薄層色譜法對(duì)栝樓桂枝滴丸進(jìn)行鑒別，建立定性鑒別方法。5.體外溶出研究:參照《中國(guó)藥典》(2015年版)槳法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，利用HPLC法對(duì)栝樓桂枝滴丸中上述7種指標(biāo)成分的體外溶出度進(jìn)行測(cè)定，并計(jì)算累積溶出百分率。6.初步穩(wěn)定性研究:對(duì)栝樓桂枝滴丸樣品進(jìn)行室溫留樣考察試驗(yàn)。7.初步藥效學(xué)研究:采用嗎替麥考酚酯誘導(dǎo)的斑馬魚(yú)中樞神經(jīng)損傷模型，以中樞神經(jīng)凋亡細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為指標(biāo)，考察栝樓桂枝滴丸的中樞神經(jīng)保護(hù)作用。
　　結(jié)果:1.HPD

4、-100型大孔樹(shù)脂為優(yōu)選樹(shù)脂，最佳純化工藝為:上樣液濃度為生藥0.3 g·mL-1，最大上樣量為生藥2.5 g·g-1干樹(shù)脂，吸附流速為2 BV·h-1，洗脫劑為70％乙醇，洗脫流速為3 BV·h-1，洗脫劑用量為6 BV。2.建立的GC法簡(jiǎn)便可行，結(jié)果可靠，4種有機(jī)殘留物均未檢出。3.最佳制備工藝為:藥物-基質(zhì)的比例為1∶5，復(fù)合基質(zhì)聚乙二醇4000-聚乙二醇6000的質(zhì)量比為3∶2，滴速為20滴·min-1，料液溫度為70℃，滴距為

5、4 cm，冷凝溫度為10℃。4.建立的定量鑒別和定性鑒別方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，能夠有效控制栝樓桂枝滴丸的質(zhì)量。5.栝樓桂枝滴丸中7種指標(biāo)成分在15 min內(nèi)的累積溶出率均達(dá)到98％以上，符合相關(guān)要求。6.栝樓桂枝滴丸樣品在考察期內(nèi)，其性狀、鑒別以及指標(biāo)成分的含量均無(wú)明顯變化，質(zhì)量穩(wěn)定。7.栝樓桂枝滴丸各濃度組斑馬魚(yú)中樞神經(jīng)凋亡細(xì)胞熒光強(qiáng)度均明顯低于模型組，能夠明顯抑制中樞神經(jīng)細(xì)胞的凋亡。
　　結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)優(yōu)選的大孔樹(shù)脂純化工藝