Rho-GDIγ對神經(jīng)干細(xì)胞分化的影響.pdf

1、神經(jīng)干細(xì)胞是一種可以分化為神經(jīng)元，膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞并且可以自我更新以補(bǔ)充大腦細(xì)胞的細(xì)胞。神經(jīng)干細(xì)胞分化機(jī)制的研究對于闡釋神經(jīng)發(fā)育、基因調(diào)控具有重要理論意義，對于神經(jīng)系統(tǒng)疾病治療、細(xì)胞移植等具有潛在臨床實(shí)用價(jià)值。Rho蛋白家族成員通過調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架肌動蛋白的重組來調(diào)節(jié)細(xì)胞的多種功能。比如：細(xì)胞形態(tài)改變，細(xì)胞聚合和細(xì)胞間粘連。Rho蛋白家族成員有兩種互變形式：GDP結(jié)合的失活形式和GTP結(jié)合的激活形式，激活狀態(tài)的Rho蛋白將和其下游效應(yīng)

2、因子作用而行使其細(xì)胞功能。兩種調(diào)節(jié)因子可以調(diào)節(jié)Rho蛋白的活性：GDP/GTP交換因子(GEPs)，促進(jìn)GDP/GTP交換反應(yīng)；GDP解離抑制因子(GDIs)，抑制GDP/GTP交換反應(yīng)。Rho-GDIγ是Rho-GDI家族的成員，只在腦和胰腺中高表達(dá)。 為了研究神經(jīng)干細(xì)胞分化基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，通過基因表達(dá)譜分析發(fā)現(xiàn)神經(jīng)干細(xì)胞分化過程與G13信號通路密切相關(guān)；生物信息學(xué)方法推導(dǎo)出了基因表達(dá)和調(diào)控的信號通路并且揭示Rho-GDIγ在神

3、經(jīng)干細(xì)胞分化網(wǎng)絡(luò)中的重要作用。為了研究Rho-GDIγ基因在神經(jīng)干細(xì)胞分化過程中的作用，構(gòu)建了3個(gè)siRNA沉默載體，實(shí)施了基因沉默。Real Time PCR揭示了Rho-GDIγ基因的有效沉默(下調(diào)6.87倍)以及該基因下調(diào)導(dǎo)致的相關(guān)基因(RhoA，Cdc42，Rac1，Limk2和N-WASP)的表達(dá)水平變化。統(tǒng)計(jì)分析表明：RhoA，Cdc42，Limk2和N-WASP的轉(zhuǎn)錄被顯著下調(diào)，Rac1有一些上調(diào)；Rho-GDIγ基因的下