兩株中國(guó)南海柳珊瑚來源真菌次級(jí)代謝產(chǎn)物及其抗菌活性研究.pdf

1、海洋中的微生物具有極其豐富的物種多樣性，而且生物活性獨(dú)特，是發(fā)現(xiàn)海洋來源藥物的前沿研究領(lǐng)域。海洋微生物中蘊(yùn)含了大量有特殊藥理活性的新穎化合物，結(jié)構(gòu)類型多樣，顯示了廣闊的藥用前景。本研究以兩株中國(guó)南海柳珊瑚來源的真菌為研究對(duì)象，以抗菌活性篩選為指導(dǎo)，進(jìn)行次級(jí)代謝產(chǎn)物研究，以期獲得具有抗菌活性的化合物，從而為海洋活性天然產(chǎn)物以及海洋藥物先導(dǎo)化合物的篩選和發(fā)現(xiàn)提供基礎(chǔ)資料。
　　本研究對(duì)花柳珊瑚來源真菌小球殼孢菌Microsphaero

2、psis sp.RA10-14發(fā)酵液和蕾二岐燈芯柳珊瑚來源真菌曲霉Aspergillus sp.XS-2009-0066化學(xué)表觀遺傳修飾發(fā)酵液中抗菌活性化合物進(jìn)行追蹤分離，綜合運(yùn)用正、反相硅膠柱層析，Sephadex LH-20凝膠柱層析及半制備HPLC等分離手段，NMR、MS、IR、UV、CD等波譜學(xué)技術(shù)，并結(jié)合化學(xué)方法，分離并鑒定了23個(gè)化合物。
　　從真菌Microspha eropsis sp.RA10-14分離鑒定獲得1

3、1個(gè)化合物。其中包括3個(gè)聚酮類化合物(1-3)，4個(gè)色原酮類化合物(4-7)，2個(gè)異香豆素類化合物(8，9)，1個(gè)香豆素類化合物(10)和1個(gè)苔黑粉化合物(11)，其中化合物1-5是新化合物?；衔?和2是一對(duì)C-11位差向異構(gòu)體，初步的生合成途徑推導(dǎo)該類化合物可能是由聚酮類化合物轉(zhuǎn)化而來。化合物1和2的相對(duì)構(gòu)型是運(yùn)用1D NOE照射實(shí)驗(yàn)及耦合常數(shù)來確定的，絕對(duì)構(gòu)型是通過Mosher方法確定的?？咕钚栽u(píng)價(jià)結(jié)果顯示，化合物1和2具有強(qiáng)的

4、抗細(xì)菌活性，尤其是化合物1對(duì)銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)，巴西諾卡菌(Nocardiabrasiliensis)，嗜根考克式菌(Kocuria rhizophila)，巨大芽孢桿菌(Bacillusmegaterium)活性顯著，MIC值分別為0.19，0.19，0.19，0.19μM，強(qiáng)于化合物2的抗細(xì)菌活性，推測(cè)該類化合物C-11位的S構(gòu)型能增強(qiáng)抗菌活性，R構(gòu)型降低活性。異香豆素類化合物9表現(xiàn)出較好的

5、抗菌活性，而化合物8活性較小，推測(cè)異香豆素類化合物中吡喃環(huán)比呋喃環(huán)更能增強(qiáng)化合物的活性。另外，抗真菌評(píng)價(jià)結(jié)果顯示，化合物1和2表現(xiàn)出中等的抗真菌活性。除此之外，微藻克生活性評(píng)價(jià)結(jié)果顯示，化合物1-3對(duì)青島大扁藻顯示了中等強(qiáng)度的抑制活性。
　　對(duì)于菌株Aspergillus sp.XS-2009-0066，本課題組此前從中發(fā)現(xiàn)了吲哚生物堿、聯(lián)苯醚、核苷衍生物等結(jié)構(gòu)類型的化合物。本研究試圖運(yùn)用化學(xué)表現(xiàn)遺傳修飾方法改變?cè)摼拇x。在該菌

6、株培養(yǎng)基中添加DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑-5-氮雜胞苷(5-AZA)及組蛋白去乙?；敢种苿?伏立諾他(SAHA)，從發(fā)酵液中分離得到6個(gè)與前期發(fā)酵條件下不同的化合物——沒藥烷倍半萜類化合物(12-17)和6個(gè)本課題組前期曾從該菌中分離得到的化合物(18-23)?？咕钚詼y(cè)試結(jié)果顯示，化合物14對(duì)金黃色葡萄球菌(Smphyloccocus curcus)表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗菌活性，MIC值為3.13μM。而化合物17對(duì)金黃色葡萄球菌幾乎沒有抗菌活