NF-κB抑制劑對大鼠肺移植缺血再灌注損傷的保護作用.pdf

1、肺移植對于嚴重肺氣腫、原發(fā)性肺動脈高壓等終末期肺病，已經成為一種唯-的治療方法，但肺缺血再灌注損傷仍然是肺移植患者術后死亡的主要原因之一。如何減輕移植肺的缺血再灌注損傷一直是國內外肺移植研究的重點領域。缺血再灌注的病理生理過程中，各種誘導因素、炎癥介質、效應因子等構成復雜的網絡，而核因子-κB (nuclear factor kappa B NF-κB)則是這個網絡的“焦點”，它能在上游調控炎癥，并成為缺血再灌注損傷時炎癥調節(jié)的樞紐。故

2、我們把NF-κB作為作用的靶點，運用NF-κB的抑制劑吡咯烷二硫代氨甲酸酯(pyrrolidine dithiocarbamatePDTC)干預其過度激活，起到減輕肺缺血再灌注的損傷的作用。課題分為以下兩個部分： 第一部分：改良三袖套法建立大鼠左肺原位移植動物模型 目的: 探討建立更簡便有效的大鼠原位左肺移植模型。 方法: 將40只SD大鼠隨機配對，采用三袖套法進行肺動、靜脈的吻合，內支架進行支氣

3、管重建，建立大鼠肺移植模型。 結果: 進行大鼠左肺原位移植正式實驗20例，供肺灌注到摘取需時(15±3)min，供肺完成體外套管需時(5±2)min，供受體動靜脈和支氣管套管吻合需時(30±3)min，總手術平均時間(63±4)min。手術成功率90％。血氣、病理學等檢查證實成功復制了肺移植缺血再灌注模型。 結論: 該方法操作簡便，成功率高，經濟實用，可用于大鼠肺移植缺血再灌注損傷的實驗研究。 第

4、二部分：核因子-κB出抑制劑PDTC對大鼠肺移植缺血再灌注損傷的保護作用 目的: 通過建立大鼠肺移植缺血再灌注模型，檢測缺血再灌注損傷中肺組織中NF-κB、TNF-α及ICAM-1的表達，探討核因子-κB抑制劑PDTC對大鼠肺移植缺血再灌注損傷的影響及其作用機制。 方法: 實驗分3組，即假手術對照組(A組)、空白對照組(B組)和PDTC組(C組)，每組8例?？瞻讓φ战M用4℃LPDG液灌沈并保存4h，PDT

5、C組用含PDTC(40mmol/L)的4℃LPDG液灌洗并保存供肺4h。移植肺再灌注1h后結束實驗。測定肺組織濕-干重比、MPO活性，觀察移植肺組織病理改變， ELISA測定TNF-α表達水平，免疫組化染色檢測ICAM-1及NF-κB表達，RT-PCR檢測NF-κBmRNA的水平。 結果: 與空白對照組比較，PDTC組肺組織損傷程度明顯減輕，肺組織濕干重比、MPO活性均有下降(P<0.01)。NF-κB、ICAM-1及T