NF-κB抑制劑對(duì)大鼠肺移植缺血再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf

1、肺移植對(duì)于嚴(yán)重肺氣腫、原發(fā)性肺動(dòng)脈高壓等終末期肺病，已經(jīng)成為一種唯-的治療方法，但肺缺血再灌注損傷仍然是肺移植患者術(shù)后死亡的主要原因之一。如何減輕移植肺的缺血再灌注損傷一直是國(guó)內(nèi)外肺移植研究的重點(diǎn)領(lǐng)域。缺血再灌注的病理生理過程中，各種誘導(dǎo)因素、炎癥介質(zhì)、效應(yīng)因子等構(gòu)成復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)，而核因子-κB (nuclear factor kappa B NF-κB)則是這個(gè)網(wǎng)絡(luò)的“焦點(diǎn)”，它能在上游調(diào)控炎癥，并成為缺血再灌注損傷時(shí)炎癥調(diào)節(jié)的樞紐。故

2、我們把NF-κB作為作用的靶點(diǎn)，運(yùn)用NF-κB的抑制劑吡咯烷二硫代氨甲酸酯(pyrrolidine dithiocarbamatePDTC)干預(yù)其過度激活，起到減輕肺缺血再灌注的損傷的作用。課題分為以下兩個(gè)部分： 第一部分：改良三袖套法建立大鼠左肺原位移植動(dòng)物模型 目的: 探討建立更簡(jiǎn)便有效的大鼠原位左肺移植模型。 方法: 將40只SD大鼠隨機(jī)配對(duì)，采用三袖套法進(jìn)行肺動(dòng)、靜脈的吻合，內(nèi)支架進(jìn)行支氣

3、管重建，建立大鼠肺移植模型。 結(jié)果: 進(jìn)行大鼠左肺原位移植正式實(shí)驗(yàn)20例，供肺灌注到摘取需時(shí)(15±3)min，供肺完成體外套管需時(shí)(5±2)min，供受體動(dòng)靜脈和支氣管套管吻合需時(shí)(30±3)min，總手術(shù)平均時(shí)間(63±4)min。手術(shù)成功率90％。血?dú)?、病理學(xué)等檢查證實(shí)成功復(fù)制了肺移植缺血再灌注模型。 結(jié)論: 該方法操作簡(jiǎn)便，成功率高，經(jīng)濟(jì)實(shí)用，可用于大鼠肺移植缺血再灌注損傷的實(shí)驗(yàn)研究。 第

4、二部分：核因子-κB出抑制劑PDTC對(duì)大鼠肺移植缺血再灌注損傷的保護(hù)作用 目的: 通過建立大鼠肺移植缺血再灌注模型，檢測(cè)缺血再灌注損傷中肺組織中NF-κB、TNF-α及ICAM-1的表達(dá)，探討核因子-κB抑制劑PDTC對(duì)大鼠肺移植缺血再灌注損傷的影響及其作用機(jī)制。 方法: 實(shí)驗(yàn)分3組，即假手術(shù)對(duì)照組(A組)、空白對(duì)照組(B組)和PDTC組(C組)，每組8例?？瞻讓?duì)照組用4℃LPDG液灌沈并保存4h，PDT

5、C組用含PDTC(40mmol/L)的4℃LPDG液灌洗并保存供肺4h。移植肺再灌注1h后結(jié)束實(shí)驗(yàn)。測(cè)定肺組織濕-干重比、MPO活性，觀察移植肺組織病理改變， ELISA測(cè)定TNF-α表達(dá)水平，免疫組化染色檢測(cè)ICAM-1及NF-κB表達(dá)，RT-PCR檢測(cè)NF-κBmRNA的水平。 結(jié)果: 與空白對(duì)照組比較，PDTC組肺組織損傷程度明顯減輕，肺組織濕干重比、MPO活性均有下降(P<0.01)。NF-κB、ICAM-1及T