機(jī)械牽拉對人支氣管上皮樣細(xì)胞氣道重塑相關(guān)因子表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　研究機(jī)械牽拉人支氣管上皮樣（16HBE）細(xì)胞對轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）、成纖維細(xì)胞生長因子-2（FGF-2）表達(dá)的影響及其相關(guān)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制。
　　方法：
　　采用Flexcell-4000細(xì)胞柔性基底加載裝置牽拉16HBE細(xì)胞，牽拉應(yīng)力為15%，頻率為1Hz，加載時(shí)間分別為：0.5h、1h、1.5h、2h。選擇TGF-β1、FGF-2和Ca2+相對表達(dá)較高的一組以經(jīng)典瞬時(shí)感受器電位1（TRPC1）

2、抑制劑SKF96365、蛋白激酶C（PKC）抑制劑HA-100作為干預(yù)因素。將細(xì)胞分為不予以機(jī)械牽拉的空白對照組、機(jī)械牽拉組、機(jī)械牽拉+SKF96365組、機(jī)械牽拉+HA-100組。應(yīng)用Western檢測TGF-β1、FGF-2蛋白的表達(dá)，實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測TGF-β1、FGF-2 mRNA的表達(dá)，流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞內(nèi)Ca2+熒光強(qiáng)度。
　　結(jié)果：
　　16HBE細(xì)胞在15%牽拉應(yīng)力作用下，與對照組相比，4個時(shí)間點(diǎn)的TG

3、F-β1蛋白和mRNA、FGF-2蛋白和mRNA、胞內(nèi)Ca2+熒光強(qiáng)度均顯著升高（P＜0.05），作用0.5h時(shí)其增幅最大，作用1h出現(xiàn)降低，1.5h、2h表達(dá)量又逐漸升高。對0.5h機(jī)械牽拉組予以SKF96365、HA-100干預(yù)后，其TGF-β1、FGF-2 mRNA和蛋白的表達(dá)，以及Ca2+內(nèi)流均較單純牽拉組降低（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　機(jī)械牽拉可導(dǎo)致16HBE細(xì)胞氣道重塑相關(guān)因子表達(dá)增加，其信號通路可能與機(jī)