P21蛋白亞細(xì)胞定位表達(dá)對(duì)人支氣管上皮細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的:
　　研究p21表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染16HBE細(xì)胞后,P21蛋白過(guò)表達(dá)的亞細(xì)胞定位及其對(duì)細(xì)胞凋亡的影響。
　　方法:
　　用p21表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染16HBE細(xì)胞,建立表達(dá)載體模型,再分別提取總RNA和胞核、胞漿蛋白,用RT-PCR和western blot半定量方法研究P21蛋白過(guò)表達(dá)亞細(xì)胞定位情況,并用熒光顯微鏡及流式細(xì)胞儀分析P21蛋白過(guò)表達(dá)亞細(xì)胞定位對(duì)細(xì)胞凋亡的影響。
　　結(jié)果:
　　1.p21質(zhì)粒組RNA

2、表達(dá)與空質(zhì)粒組、空白對(duì)照組有顯著性差異(p=0.000﹚,空質(zhì)粒組與空白對(duì)照組無(wú)明顯差異(p=0.704)。
　　2. p21質(zhì)粒組胞漿P21蛋白表達(dá)明顯高于胞核(p=0.002),空質(zhì)粒組和空白對(duì)照組胞核P21蛋白表達(dá)高于胞漿(p=0.033,0.007)。胞漿中P21蛋白表達(dá), p21質(zhì)粒組高于對(duì)照組(p=0.000);空質(zhì)粒組與空白對(duì)照組無(wú)明顯差異(p=0.87)。胞核中P21蛋白表達(dá)三組無(wú)明顯差異(p均>0.05)。

3、>　　3. p21質(zhì)粒轉(zhuǎn)染16HBE細(xì)胞24h-72h后能導(dǎo)致16HBE細(xì)胞凋亡,凋亡低于空質(zhì)粒組和空白對(duì)照組,并隨著時(shí)間延長(zhǎng),16HBE細(xì)胞凋亡減少,但在72h時(shí)晚期凋亡和死亡細(xì)胞明顯增高。p21質(zhì)粒組24h凋亡率明顯高于48h(p=0.036);空質(zhì)粒組和空白對(duì)照組24h凋亡率明顯低于48h(p=0.033, p=0.037)。p21質(zhì)粒組分別與空質(zhì)粒組和空白對(duì)照組有顯著性差異(p<0.05),空質(zhì)粒組和空白對(duì)照組細(xì)胞凋亡無(wú)顯著性差