小鼠胚胎干細胞體外誘導分化為胰島素分泌細胞的初步研究.pdf

1、中南大學碩士學位論文小鼠胚胎干細胞體外誘導分化為胰島素分泌細胞的初步研究姓名：鄧愛民申請學位級別：碩士專業(yè)：遺傳學指導教師：盧光琇20040501胞內nestin表達陽性。流式細胞術檢測，直徑為150246139m；101885789in：55905461ma3組不同大小的擬胚體經(jīng)選擇后，nestin陽性細胞百分比分別為3526246；4103343和2993254。直徑為10188578pro大小的擬胚體選擇培養(yǎng)后，nestin陽性細

2、胞百分比明顯高于另外兩組，兩兩比較差別有統(tǒng)計學意義(pO05)。2、用lOmM煙堿誘導后的nestin陽性細胞可以形成胰島樣的細胞團狀結構，免疫組化檢測顯示：在誘導分化后第5d沒有出現(xiàn)insulin陽性細胞，15d后，胰島樣細胞團insulin表達陽性。流式細胞儀檢測顯示：OmM、5mM、lOmM3種濃度的煙堿誘導15d后得到的insulin陽性細胞的百分比分別為299a：152；4082691485a：276。lOmM組與OmM或5m

3、M兩組比有統(tǒng)計學意義(p001)。3、煙堿誘導分化后的細胞在葡萄糖刺激下能分泌胰島素。55mM濃度的葡萄糖刺激分化細胞后，收集的條件培養(yǎng)基中胰島素濃度為7461土501(pU／m1)；25mM濃度的葡萄糖刺激分化細胞后，收集的條件培養(yǎng)基中胰島素濃度為10329485(舢)。兩組分別與自發(fā)分化的對照組比，有統(tǒng)計學差別(廬O01)。55raM葡萄糖組與25raM葡萄糖組比，有統(tǒng)計學差別(∥，o05)。結論：l、小鼠胚胎干細胞經(jīng)煙堿誘導可以分