肝干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為胰島素分泌細(xì)胞的研究.pdf

1、該文采用免疫組織化學(xué)、細(xì)胞培養(yǎng)、分子克隆、SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)、放射免疫等方法和技術(shù),就近些年來(lái)干細(xì)胞領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)問(wèn)題--干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為胰島素分泌細(xì)胞進(jìn)行了研究,著重探討了肝干細(xì)胞在肝臟中的分布及遷徙,并從基因和化學(xué)因子兩個(gè)方面探討肝干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為胰島素分泌細(xì)胞的機(jī)制.全文共分四個(gè)部分.第一部分,胎肝中肝干細(xì)胞的免疫組織化學(xué)研究.采用免疫組織化學(xué)方法顯示不同時(shí)期人胚胎肝臟的干細(xì)胞,分析肝干細(xì)胞的形態(tài)與分布特

2、點(diǎn)及發(fā)育過(guò)程中干細(xì)胞在肝臟中的遷移,探討肝臟的發(fā)生發(fā)育及肝內(nèi)干細(xì)胞的來(lái)源.第二部分,神經(jīng)中間絲蛋白Nestin在胎肝干細(xì)胞中的表達(dá).為了進(jìn)一步探討肝干細(xì)胞向著胰島素分泌細(xì)胞方向分化的可塑性,采用免疫組織化學(xué)的方法研究標(biāo)記不同發(fā)育時(shí)期人胚胎肝干細(xì)胞中Nestin的表達(dá),研究肝干細(xì)胞向著胰島素分泌細(xì)胞方向分化的可能性的同時(shí)探索肝干細(xì)胞新的表面標(biāo)志蛋白.第三部分,pEGFP-PDX-1表達(dá)載體的構(gòu)建.構(gòu)建真核表達(dá)質(zhì)粒,從基因誘導(dǎo)方面著手研究胰

3、腺內(nèi)分泌細(xì)胞發(fā)育的關(guān)鍵基因PDX-1在肝干細(xì)胞定向分化中的調(diào)控機(jī)制,為胰島及β-細(xì)胞發(fā)育的基因調(diào)控機(jī)制的研究提供理論參考.第四部分,卵圓細(xì)胞誘導(dǎo)分化為胰島素分泌細(xì)胞.在充分研究肝臟內(nèi)干細(xì)胞的分布和定位的前提下分離大鼠肝臟卵圓細(xì)胞,在化學(xué)誘導(dǎo)劑作用之下使卵圓細(xì)胞定向分化為胰島素分泌細(xì)胞,檢測(cè)誘導(dǎo)后肝干細(xì)胞的表型變化,研究肝干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化機(jī)制,為干細(xì)胞的定向分化和干細(xì)胞誘導(dǎo)分化的替代療法的臨床實(shí)踐提供實(shí)驗(yàn)參考.以上研究表明化學(xué)誘導(dǎo)劑Nic