S100A2在腎透明細胞癌中的表達及功能研究.pdf

1、目的:S100A2是S100家族的一員，調節(jié)多種細胞內外的功能，如增殖、凋亡，分化等。近些年來，研究發(fā)現S100A2在腫瘤組織中的表達水平及其活性變化可能促進或抑制腫瘤的發(fā)生發(fā)展。多項研究表明S100A2在多種不同類型腫瘤組織中的表達存在異常，如結腸癌、喉鱗狀細胞癌、頭頸癌、前列腺癌、乳腺癌等，查閱相關數據庫，發(fā)現有關于S100A2在腎透明細胞癌中的表達及其功能目前尚無研究報道。本課題主要探究S100A2在腎透明細胞癌的腫瘤組織和相應的

2、瘤旁組織中的表達情況，研究S100A2對腎腫瘤細胞周期變化及增殖能力的影響,進而探討S100A2在腎透明細胞癌發(fā)生中所起到的作用，為臨床診治腎腫瘤提供新的線索。
　　方法:①實時定量聚合酶鏈式反應(real-time PCR)檢測46例腎透明細胞癌及其相應的瘤旁組織中S100A2的mRNA表達水平，通過western-blot和免疫組織化學的方法S100A2蛋白在腎透明細胞癌及其相應的癌旁組織的表達水平;②Western-blot

3、以及實時定量PCR檢測人腎透明細胞癌細胞株769-P，786-O，OS-RC-2和正常腎小管上皮HK2細胞株中S100A2的mRNA及蛋白水平的表達;③通過構建過表達S100A2的慢病毒質粒，培育過表達S100A2的穩(wěn)轉786-O及769-P腎癌細胞株;④通過細胞周期實驗及MTS實驗分別檢測正常的786-O及769-P及相應的穩(wěn)轉細胞株的周期及增殖情況。
　　結果:①S100A2的mRNA水平在腎透明細胞癌腫瘤標本組織中的表達顯著

4、下調(p＜0.01)，其相對應的組織蛋白水平與mRNA變化一致;②在腎透明細胞癌細胞株786-0、769-P、OS-RC-2中，S100A2的mRNA及蛋白表達水平比HK2細胞株低（p值均＜0.05），這與腫瘤標本中結果相一致;③我們構建成功了過表達S100A2質粒，并進行了慢病毒包裝，培育出了過表達S100A2的腎透明細胞癌穩(wěn)轉細胞系786-0和769-P;④與正常及轉染了空載體的786-O和769-P相比，過表達S100A2的細胞株