Rap2B在腎透明細胞癌中的表達及其意義.pdf

1、目的：探討Rap2B在腎透明細胞癌中的表達及其意義，探索其在腎透明細胞癌發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移過程中的機制，以期為腎透明細胞癌提供新的診斷標記物及為生物治療提供新的作用靶點。
　　方法：Western Blot方法檢測Rap2B在腎透明細胞癌細胞與正常腎細胞中的表達：收集附院泌尿外科腎透明細胞癌患者術(shù)后標本，Western Blot方法檢測Rap2B在腎透明細胞癌組織與癌旁組織中的表達；把收集到的附院腎透明細胞癌患者標本制成病理組織切片

2、，免疫組化檢測Rap2B在腎透明細胞癌與癌旁組織中的表達；芯片免疫組化后檢測腎透明細胞癌芯片中Rap2B的表達與病理分期、患者年齡等的相關(guān)性。構(gòu)建Rap2B過表達質(zhì)粒pcDNA3-Rap2B和Rap2B CAAX基序突變體質(zhì)粒pcDNA3-Rap2B(C180A)，分別用pcDNA3、pcDNA3-Rap2B、pcDNA3-Rap2B(C180A)、對照siRNA和Rap2B-siRNA轉(zhuǎn)染786-O細胞，劃痕實驗和Transwell遷

3、移實驗檢測786-O細胞劃痕愈合和遷移的差異。
　　結(jié)果：1)腎透明細胞癌細胞中Rap2B在蛋白水平的表達高于腎正常細胞，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；2)Rap2B在腎透明細胞癌組織中表達水平明顯高于癌旁組織，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；3)免疫組化顯示：Rap2B主要定位于癌細胞胞膜上，正常細胞中很少，在腎透明細胞癌組織和芯片中Rap2B表達高于癌旁組織，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，組織芯片顯示Rap2B表達與

4、病理分期、患者年齡等無相關(guān)性；4)劃痕實驗結(jié)果顯示：與轉(zhuǎn)染pcDNA3對照質(zhì)粒相比，轉(zhuǎn)染pcDNA3-Rap2B質(zhì)粒的細胞劃痕愈合速度較快，而轉(zhuǎn)染pcDNA3-Rap2B(C180A)突變體質(zhì)粒的細胞無明顯變化；與轉(zhuǎn)染Rap2B-siRNA的細胞相比，轉(zhuǎn)染對照siRNA的細胞劃痕愈合速度較快；5)Transwell遷移實驗顯示：與轉(zhuǎn)染pcDNA3對照質(zhì)粒相比，轉(zhuǎn)染pcDNA3-Rap2B質(zhì)粒的細胞遷移數(shù)目較多，而轉(zhuǎn)染pcDNA3-Rap