丁苯酞動員內皮祖細胞治療缺血性卒中大鼠的實驗研究.pdf

1、目的:觀察不同劑量丁苯酞對大腦中動脈缺血(MCAO)/再灌注模型大鼠神經功能、循環(huán)內皮祖細胞(circulating endothelial progenitor cells,EPCs)水平及梗死區(qū)血管新生的影響,探討其治療缺血性卒中的療效及機制。
　　方法:選取健康雄性大鼠Sprague-Dawley(SD)大鼠48只,體重(250±20)g,按照隨機分組法分為假手術組,模型對照組,NBP低劑量治療組(60mg/kg.d)和NB

2、P高劑量治療組(120mg/kg.d),每組各12只。假手術組僅分離頸部血管而不插入線栓。其他三組均采用線栓法建立大鼠MCAO/再灌注模型,假手術組與模型組各取2只行TTC染色法觀察大鼠梗塞區(qū)形態(tài)學改變,其余大鼠分別給予安慰劑(大豆油)(2ml/d)及兩種劑量的NBP灌胃治療,持續(xù)5d。每天對四組大鼠進行神經功能缺損評分;給藥前及灌胃5d后分兩次采集大鼠外周血,流式細胞儀檢測治療前后循環(huán)EPCs的數(shù)量;灌胃5d后行血管內皮細胞標記物CD

3、31及vWF免疫組化染色,觀察各組大鼠缺血區(qū)血管新生情況。GraphPad5.0軟件系統(tǒng)對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析處理。
　　結果:
　　1)腦TTC染色后可見線栓側大腦半球明顯梗死病灶,呈蒼白色,非梗死區(qū)顯示為紅色;
　　2)NBP治療第1d,低劑量組大鼠神經功能評分開始出現(xiàn)降低(P<0.05),高劑量組神經功能評分明顯降低(P<0.01),模型對照組大鼠神經功能評分在灌胃3d后出現(xiàn)明顯降低(P<0.01);
　　

4、3)NBP治療第1d,低劑量組大鼠神經功能評分低于對照組(P<0.05),高劑量組神經功能評分明顯低于對照組(P<0.01);第2-5d,NBP兩種劑量治療組大鼠神經功能評分均顯著低于對照組(P<0.01);
　　4)NBP治療第3d,高劑量組神經功能評分明顯低于低劑量組(P<0.01);
　　5)灌胃5d后與缺血2h再灌注時比較,假手術組大鼠外周血EPCs數(shù)量無明顯變化,其余各組均顯著增加(P<0.01);
　　6)

5、不同劑量NBP治療組大鼠在5d后的外周血EPCs數(shù)量均顯著高于對照組(P<0.01);NBP高劑量組外周血EPCs水平顯著高于低劑量組(P<0.01);
　　7)假手術組腦切片顯微鏡下可見抗CD31陽性細胞和抗vWF陽性細胞,呈正常腦組織內血管染色;對照組腦切片幾乎未見或極少量表達抗CD31陽性或抗vWF陽性細胞,提示腦缺血區(qū)血管破壞;NBP治療組腦切片在光鏡下均可看到抗CD31陽性及抗vWF陽性細胞大量表達,其中NBP高劑量治療