1,25-二羥維生素D3對IgA腎病大鼠中IL-4的調(diào)節(jié)作用.pdf

1、目的：
　　本研究主要通過觀察1,25(OH)2D3對 IgA腎病大鼠 IL-4的影響，探討1,25(OH)2D3對大鼠IgAN的免疫調(diào)節(jié)作用，為臨床治療IgA腎病提供新的思路。
　　方法：
　?。?）選用Wister大鼠52只，隨機(jī)抽取8只大鼠作為正常對照組（A組），余44只大鼠采用抗原（牛γ球蛋白）直接刺激粘膜免疫的方式建立IgA腎病模型。
　?。?）剔除造模鑒定用大鼠及死亡大鼠，將造模成功的32只大鼠隨機(jī)分

2、為為干預(yù)組（B組）、強(qiáng)的松組（C組）、1,25(OH)2D3組（D組）、及強(qiáng)的松+1,25(OH)2D3聯(lián)合治療組（E組），每組8只，各治療組分別進(jìn)行相應(yīng)的藥物干預(yù)，正常對照組及未干預(yù)組給予等量生理鹽水灌胃。
　?。?）分別檢測各組大鼠尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、24小時(shí)尿蛋白、血肌酐、血鈣、血磷的變化情況，采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(Real-time PCR)檢測各大鼠脾臟淋巴細(xì)胞白細(xì)胞介素4（IL-4）mRNA的水平，采用免疫組化及We

3、stern blot檢測大鼠腎臟IL-4蛋白水平的變化。
　　結(jié)果：
　?。?）24小時(shí)尿蛋白定量（mg/24h）：A組(正常對照組)為7.27±0.86；B組(未干預(yù)組)為49.37±2.96；C組(強(qiáng)的松組)為15.26±1.57；D組(1,25(0H)2D3治療組)為21.05±2.06；E組(強(qiáng)的松+1,25(0H)2D3聯(lián)合治療組)為10.16±1.39。經(jīng)治療后C、D、E組24h尿蛋白較B組均有下降(P<0.05

4、)，其中E組下降最顯著(P<0.05)。
　?。?）尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（個(gè)/ul）：A組為5.03±2.55；B組為328±7.04；C組為18±3.06；D組為162±5.36；E組為9±3.15。經(jīng)治療后C、D、E組尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)較B組均有下降(P<0.05)，其中E組下降最顯著(P<0.05)。
　?。?）各組大鼠的血肌酐（μmol/L）水平：A組為42.76±2.42；B組為45.23±2.01；C組為45.21±1.52；

5、D組為43.98±2.36；E組為43.44±2.4。各組大鼠的血鈣（mmol/L）水平：A組為2.35±0.22、B組2.28±0.17、C組2.38±0.09、D組2.44±0.11、E組2.50±0.14。各組大鼠的血磷（mmol/L）水平：A組為2.85±0.27；B組為2.90±0.32；C組為2.86±0.22；D組為2.89±0.33；E組為2.80±0.25。各組血肌酐、血鈣、血磷水平未見顯著變化，差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>

6、0.05）。
　?。?）IL-4平均光密度值：A組為0.080±0.030；B組為0.230±0.013:；C組為0.162±0.021；D組為0.199±0.031；E組為0.092±0.024。經(jīng)治療后C、D、E組平均光密度較B組均有下降(P<0.05)，其中E組下降最顯著(P<0.05)；IL-4的表達(dá)與24小時(shí)尿蛋白呈正相關(guān)（P<0.05），與尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)無明顯相關(guān)性。
　　（5）大鼠脾臟淋巴細(xì)胞IL-4的mRNA相

7、對表達(dá)量：A組為0.1897±0.0010；B組為0.8314±0.0013；C組為0.5901±0.0008；D組為0.6617±0.0018；E組0.3822±0.0007。經(jīng)治療后C、D、E組尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)較B組均有下降(P<0.05)，其中E組下降最顯著(P<0.05)。
　　（6）大鼠腎臟IL-4蛋白表達(dá)：A組、B組、C組、D組、E組分別為0.137±0.004、0.701±0.003、0.390±0.001、0.517±