1,25-二羥維生素D3對(duì)IgA腎病大鼠中IL-23-IL-17軸的調(diào)節(jié)作用.pdf

1、目的：
　　檢測(cè)IL-23和IL-17在IgAN大鼠中的表達(dá)，探討1,25-二羥維生素D3對(duì)IgAN大鼠中IL-23/IL-17軸的調(diào)節(jié)作用。
　　方法：
　　購(gòu)買(mǎi)52只Wistar大鼠，隨機(jī)選取42只大鼠制作IgA腎病模型，采用抗原直接刺激食管胃粘膜內(nèi)皮細(xì)胞后激活巨噬細(xì)胞的方法。剩余10作為正常對(duì)照組（A組），在制作IgAN大鼠期間給予相同劑量的蒸餾水灌胃+生理鹽水尾靜脈注射。第8周經(jīng)病理免疫熒光法檢測(cè)IgAN造模成

2、功后剔除死亡大鼠，將造模成功的IgAN大鼠隨機(jī)分為模型組（B組）、1,25二羥維生素D3治療組(C組)、強(qiáng)的松治療組(D組)、聯(lián)合治療組(E組),分別給予強(qiáng)的松（醋酸潑尼松）（10mg/kg/d）及1,25-二羥維生素D3（10ng/100g/d）灌胃，模型組（B組）及正常對(duì)照組（A組）給以同等劑量蒸餾水灌胃。2周后檢測(cè)24h尿蛋白定量，尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)，血肌酐、血磷、血鈣值；RT-PCR法測(cè)定脾臟組織中IL-23mRNA、IL-17mRN

3、A變化，免疫組化法檢測(cè)大鼠腎臟組織中IL-17、IL-23的變化。
　　結(jié)果：
　?。?)24小時(shí)尿蛋白定量（mg/24h）： A組(正常對(duì)照組)為7.01±0.23；B組(模型組)為51.16±2.12；C組(1,25(0H)2D3組)為26.15±1.97；D組(強(qiáng)的松組)為12.99±1.52；E組(聯(lián)合治療組)為9.89±1.60；B組24h尿蛋白定量較A組增加，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)，經(jīng)治療處理后C、

4、D、E組24h尿蛋白較模型組(B組)均有下降(p<0.05)，其中E組下降最顯著。
　　（2）尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（個(gè)/ul）：A組為2.3±1.40；B組為375±16.68；C組為157±20.7；D組為20±3.37；E組為7±2.96； B組尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)較A組增加，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)；治療組C、D、E組較模型組（B組）尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)均有下降(p<0.05)，其中E組下降最明顯。
　?。?）各組大鼠血肌酐水平（

5、μmol/L）：A組為45.08±1.82；B組為44.56±1.16、C組為44.18±2.0、D組為43.57±1.5、E組為43.39±1.65。各組大鼠血鈣（mmol/L）水平：A組為2.22±0.13、B組2.36±0.19、C組2.36±0.15、D組2.33±0.19、E組2.29±0.12。各組大鼠血磷（mmol/L）水平：A組為2.81±0.09、B組為2.83±0.19、C組為2.71±0.12、D組為2.72±0.

6、11、E組為2.80±0.15。各組大鼠血肌酐、血鈣、血磷的水平未見(jiàn)顯著變化，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）。
　　（4）IL-23平均光密度值：A組為0.038±0.009；B組為0.377±0.021；C組為0.264±0.011；D組為0.162±0.009；E組為0.101±0.016；B組（模型組）IL-23平均光密度值較A組（正常對(duì)照組）上升，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)；經(jīng)治療處理后C、D、E組IL-23平

7、均光密度較B組均有下降(p<0.05)，其中E組下降最顯著；IL-17平均光密度值：A組為0.027±0.011；B組為0.322±0.016；C組為0.265±0.015；D組為0.137±0.012；E組為0.089±0.015；B組（模型組）IL-17平均光密度值較A組（正常對(duì)照組）上升，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；經(jīng)治療處理后C、D、E組IL-17平均光密度較B組均有下降(p<0.05)，其中E組下降最顯著；各組大鼠腎

8、組織中IL-23表達(dá)與IL-17表達(dá)正相關(guān)性（p<0.05）；各組IL-23和IL-17的表達(dá)與24尿蛋白定量呈正相關(guān)（p<0.05），B組IL-23和IL-17的表達(dá)與B組尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)正相關(guān)（p<0.05），其余各組與尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)無(wú)相關(guān)性（p＞0.05）。
　?。?）大鼠脾臟IL-23mRNA相對(duì)表達(dá)量：A組為0.311±0.023、B組為0.936±0.020、C組為0.760±0.021、D組為0.514±0.010、E組0

9、.407±0.020；B組（模型組）脾臟IL-23mRNA的表達(dá)量較A組（正常對(duì)照組）上升，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)，經(jīng)治療后C、D、E組脾臟IL-23mRNA表達(dá)量較B組均有下降(p<0.05)；大鼠脾臟IL-17mRNA相對(duì)表達(dá)量：A組為0.142±0.005、B組為0.846±0.016、C組為0.596±0.021、D組為0.451±0.021、E組0.311±0.020；B組（模型組）脾臟IL-17mRNA表達(dá)量較

10、A組上升，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)，經(jīng)治療后C、D、E組脾臟IL-23mRNA表達(dá)量較B組（模型組）均有下降(p<0.05)；各組大鼠脾臟IL-23mRNA表達(dá)與IL-17mRNA表達(dá)正相關(guān)性（p<0.05）；各組大鼠脾臟IL-23mRNA、IL-17mRNA分別與尿蛋白定量呈正相關(guān)（p<0.05），B組大鼠脾臟IL-23mRNA、IL-17mRNA的表達(dá)與B組尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)正相關(guān)（p<0.05），其余各組與尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)無(wú)相關(guān)性