華佗再造丸對(duì)腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)功能恢復(fù)及神經(jīng)再生的影響.pdf

1、目的：研究華佗再造丸（HT）對(duì)腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)功能恢復(fù)及神經(jīng)再生的作用及其分子機(jī)制，并研究HT對(duì)腦缺血再灌注大鼠認(rèn)知功能的影響，為臨床應(yīng)用華佗再造丸對(duì)中風(fēng)恢復(fù)期的治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：1.200只雄性SD大鼠，阻斷大腦中動(dòng)脈90 min后再灌注，24 h后采用Zea-Longa評(píng)分，分組：假手術(shù)組、模型組、華佗再造丸0.5 g/kg組、華佗再造丸1.0 g/kg組、華佗再造丸2.0 g/kg組。給藥后，采用圓筒實(shí)驗(yàn)、貼

2、膠布實(shí)驗(yàn)、平衡木實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)神經(jīng)功能恢復(fù)狀況；5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷（EDU）/神經(jīng)元核抗原（NeuN）免疫熒光雙標(biāo)法觀察華佗再造丸對(duì)神經(jīng)再生的影響；RT-PCR檢測(cè)華佗再造丸對(duì)腦缺血再灌注大鼠腦組織中腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（BDNF）mRNA表達(dá)的影響；Western blot檢測(cè)華佗再造丸對(duì)腦組織中蛋白激酶A（PKA）、環(huán)磷腺苷效應(yīng)元件結(jié)合蛋白（CREB）、磷酸化環(huán)磷腺苷效應(yīng)元件結(jié)合蛋白（p-CREB）、BDNF、基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-

3、1（SDF-1）、趨化因子受體（CXCR4）表達(dá)的影響；2.同樣方法制備腦缺血再灌注模型，連續(xù)給藥30 d，進(jìn)行Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)，觀察華佗再造丸對(duì)大鼠逃避潛伏期、游泳速度、目標(biāo)象限停留時(shí)間以及游泳總路程的影響。
　　結(jié)果：1.與模型組相比，給予華佗再造丸14 d后，腦缺血再灌注大鼠不對(duì)稱值降低（p<0.01或p<0.05），感受到膠布所需時(shí)間縮短（p<0.01），走平衡木時(shí)間縮短（p<0.01或p<0.05）；給予華佗再造丸

4、28 d后，腦缺血再灌注大鼠不對(duì)稱值降低（p<0.01或p<0.05），感受到膠布所需時(shí)間縮短（p<0.01），走平衡木時(shí)間縮短（p<0.01或p<0.05）；給予華佗再造丸3 d后，大鼠腦內(nèi)BDNF mRNA的表達(dá)顯著增加（p<0.01）；給予華佗再造丸7 d后，NeuN/EDU免疫熒光雙標(biāo)細(xì)胞表達(dá)明顯增多（p<0.01或p<0.05），大鼠缺血側(cè)腦組織PKA、p-CREB/CREB、BDNF、SDF-1和CXCR4蛋白表達(dá)明顯增加（

5、p<0.01或p<0.05）。2.與模型組相比，在本實(shí)驗(yàn)劑量下華佗再造丸組大鼠逃避潛伏期、游泳速度、目標(biāo)象限停留時(shí)間和游泳總路程無明顯改變（p>0.05）。
　　結(jié)論：華佗再造丸可促進(jìn)腦缺血再灌注大鼠的神經(jīng)再生進(jìn)而改善其神經(jīng)功能；華佗再造丸促進(jìn)腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)再生機(jī)制與其調(diào)節(jié)PKA/CREB/BDNF信號(hào)通路及SDF-1/CXCR4有關(guān)；華佗再造丸在本實(shí)驗(yàn)劑量下對(duì)腦缺血再灌注所致大鼠認(rèn)知功能障礙無改善作用。
　　創(chuàng)新點(diǎn)：