博吉亞椰子植原體媒介昆蟲的初步鑒定.pdf

1、植原體是引起許多重要作物病害，由介體昆蟲傳播的柔膜菌綱病原體。篩選確定植原體的介體昆蟲對(duì)于病害的防控和綜合治理是非常重要的，但在試驗(yàn)方法和試驗(yàn)進(jìn)度上也非常具有挑戰(zhàn)性，特別是對(duì)比較高大的棕櫚科的植物。因?yàn)樾枰罅康睦ハx和健康的供試植株，在時(shí)間上也往往需要持續(xù)數(shù)月甚至更久。僅僅檢測(cè)昆蟲體內(nèi)是否含有植原體 DNA，不能作為判斷昆蟲為其介體的依據(jù)，要確認(rèn)昆蟲為介體，植原體需要克服昆蟲腸道和唾液腺的障礙和定殖，然后隨著昆蟲的取食能夠傳播植原體到寄

2、主植物。一個(gè)相當(dāng)于傳播試驗(yàn)的相對(duì)新的方法通過用分子技術(shù)檢測(cè)昆蟲取食過后的蔗糖溶液中的植原體DNA發(fā)展起來。本研究結(jié)合人工蔗糖飼養(yǎng)液法和環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增法（loop-mediated isothermal amplification，LAMP）試驗(yàn)，檢測(cè)了大洋洲巴布亞新幾內(nèi)亞（Papua New Guinea）的博吉亞椰子病害（Bogia coconut syndrome，BCS）區(qū)域的半翅目11個(gè)昆蟲分類種的627個(gè)樣本。通過LAMP法檢

3、測(cè)有6種昆蟲的頭部組織和昆蟲取食過的蔗糖飼養(yǎng)液中的植原體DNA都為陽性結(jié)果的樣本，它們屬于四個(gè)科：袖蠟蟬科（Derbidae）、璐蠟蟬科（Lophopidae）、蛾蠟蟬科（Flatidae）和廣翅蠟蟬科（Ricaniidae）。還有兩種昆蟲的檢測(cè)結(jié)果只在頭部組織中為陽性，余下三種昆蟲的檢測(cè)結(jié)果全部為陰性。通過巢式PCR驗(yàn)證陽性樣本并測(cè)序，序列結(jié)果顯示只有一種植原體序列，且在GenBank中BLAST顯示該序列和植原體16SrIV組的'C