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文檔簡(jiǎn)介
1、在植物的發(fā)病早期快速、準(zhǔn)確鑒定出病原菌,以防止其傳播和流行、減少經(jīng)濟(jì)損失具有重要的意義。發(fā)展快速、靈敏、高通量的分子檢測(cè)技術(shù)對(duì)提升我國(guó)植物病害控制水平,尤其是阻止外來(lái)農(nóng)林危險(xiǎn)生物入侵、保護(hù)我國(guó)農(nóng)林經(jīng)濟(jì)安全生產(chǎn)與生態(tài)安全有著重要意義。目前基于PCR技術(shù)的分子檢測(cè)方法無(wú)法滿足對(duì)大批量樣本檢測(cè)的需要,因此尋找其他的分子檢測(cè)靶標(biāo),發(fā)展植物病原菌高通量檢測(cè)方法,對(duì)完善病原細(xì)菌分子檢測(cè)技術(shù)、提升我國(guó)植物檢疫的技術(shù)水平和提升我國(guó)植物病害控制水平具有重
2、要意義。
高通量是目前植物病原菌分子檢測(cè)的發(fā)展方向,而基于PCR擴(kuò)增的普通分子檢測(cè)方法無(wú)法一次檢測(cè)多種病原菌。因此,發(fā)展高通量檢測(cè)方法對(duì)于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和口岸檢疫具有重要意義。分子探針和DNA陣列技術(shù)等技術(shù)的出現(xiàn)為發(fā)展植物病原菌高通量檢測(cè)提供了新的思路和方法。Padlock探針是一種長(zhǎng)的寡核苷酸探針,其兩端的序列可通過(guò)與靶標(biāo)DNA序列互補(bǔ)配對(duì)而使探針結(jié)合成環(huán)狀。Padlock探針不僅具有非常高的特異性,同時(shí)還可與DNA陣列技術(shù)結(jié)
3、合進(jìn)行高通量檢測(cè)。本研究設(shè)計(jì)了6種重要植物病原菌(Erwinia amylovora,Erwinia pyrifloiae,Pantoea stewartii subsp.stewartii,Acidovorax avenae subsp.citrulli,Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xanthomonas oryzaepv.oryzicola)的padlock探針,并對(duì)這些探針的特異性和靈敏度進(jìn)行了驗(yàn)證。
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