2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、目的:體外培養(yǎng)刺激AFP特異性T細(xì)胞,檢測(cè)其殺傷功能,為研究AFP158-166特異性T細(xì)胞免疫治療奠定基礎(chǔ)。
   方法:采用帶FITC熒光標(biāo)記的HLA-A2抗體,流式細(xì)胞技術(shù)篩選HLA-A2陽性健康志愿者,通過HLA-A2基因分型高分辨檢測(cè)試劑盒(PCR-SSP),選擇其中基因型為HLA-A0201者,取其外周血,密度梯度離心法分離獲取外周血單核細(xì)胞(PBMC),通過加入人GM-CSF、IL-4及TNF-α等細(xì)胞因子貼壁粘附

2、培養(yǎng)法培養(yǎng)收獲樹突狀細(xì)胞(DC),將DC負(fù)載HLA-A0201表位態(tài)AFP158-166后,按1:10比例將其與新鮮淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng),并加入人細(xì)胞因子IL-2刺激,出現(xiàn)細(xì)胞大量增殖后收獲細(xì)胞,行細(xì)胞毒性試驗(yàn),用MTT法分別檢測(cè)其殺傷肝癌細(xì)胞、負(fù)載AFP的T2細(xì)胞,以及未負(fù)載AFP的T2的能力。
   結(jié)果:從13例健康志愿者中篩選出基因型HLA-A0201陽性者4例,每50ml外周血培養(yǎng)的細(xì)胞中可收獲DC細(xì)胞2×106個(gè),培養(yǎng)至

3、第7天檢測(cè)表面抗原:CD83、CD80和CD86陽性率分別為(81.3±2.4)%、(92.8±1.4)%和(70.5±1.9)%。將DC負(fù)載AFP與淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)14d左右出現(xiàn)大量細(xì)胞增殖,行細(xì)胞毒性試驗(yàn)結(jié)果示,其對(duì)肝癌細(xì)胞、負(fù)載AFP的T2細(xì)胞有明顯殺傷作用,而對(duì)未負(fù)載AFP的T2細(xì)胞殺傷作用不明顯。
   結(jié)論:通過加入GM-CSF、IL-4及TNF-α等細(xì)胞因子體外貼壁粘附培養(yǎng)人PBMC可收獲樹突狀細(xì)胞,將樹突狀細(xì)胞負(fù)

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