Th17細(xì)胞及相關(guān)因子在穩(wěn)定期慢性阻塞性肺疾病患者肺部的表達(dá)及意義.pdf

1、第一部分肺功能正常吸煙者和慢性阻塞性肺疾病患者肺組織中白細(xì)胞介素17的表達(dá)及意義
　　 目的：探討白細(xì)胞介素17(IL-17)在肺功能正常吸煙者和慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺部炎癥反應(yīng)發(fā)生機(jī)制中的作用。
　　 方法：將需手術(shù)治療的周?chē)头伟┗颊叻譃榉喂δ苷７俏鼰熃M(NS組，10例)、肺功能正常吸煙組(S組，13例)、吸煙COPD穩(wěn)定期組(COPD組，10例)。于手術(shù)切除標(biāo)本選取距肺癌病灶5～8cm處的新鮮正常肺組

2、織，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELASA)檢測(cè)各組肺組織勻漿IL-17含量，HE和維多利亞藍(lán)+范吉遜染色檢測(cè)各組平均肺泡面積、小氣道總病理積分和肺腺泡肌型動(dòng)脈(MA)管壁厚度，免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)IL-17+及CD4+、CD8+T細(xì)胞在肺泡壁、小氣道壁及MA管壁的表達(dá)，分析IL-17表達(dá)與CD4+、CD8+T細(xì)胞以及與肺實(shí)質(zhì)病理改變和肺功能指標(biāo)的相關(guān)關(guān)系。
　　 結(jié)果：（略）
　　 結(jié)論：IL-17在肺功能正常吸煙者和COPD患

3、者肺組織中表達(dá)增高，與肺CD4+、CD8+T細(xì)胞及肺組織破壞、氣道炎癥、肺動(dòng)脈重構(gòu)和氣流受限密切相關(guān)，提示IL-17在吸煙者和COPD患者肺部炎癥反應(yīng)發(fā)生機(jī)制中有促炎作用。
　　 第二部分輔助T細(xì)胞17在肺功能正常吸煙者及COPD患者肺部組織中的活化、分布及作用
　　 目的：觀(guān)察肺功能正常吸煙者和COPD患者肺組織是否存在活化的輔助T細(xì)胞(Th)17即CD4+IL-17+細(xì)胞，其活化程度以及與IL-17之間的相關(guān)關(guān)系，探

4、討肺實(shí)質(zhì)中IL-17是否來(lái)源于Th17細(xì)胞。分析CD4+IL-17+細(xì)胞在肺部的表達(dá)及分布并與肺部病理、肺功能指標(biāo)改變之間做相關(guān)分析關(guān)系，探討Th17細(xì)胞在COPD炎癥反應(yīng)中的作用。
　　 方法：實(shí)驗(yàn)病例入選及分組同第一章。熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)方法檢測(cè)肺組織勻漿Th17細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子RORgammat(維甲酸相關(guān)孤獨(dú)受體γt)的RNA表達(dá)水平，蛋白質(zhì)印跡(Westermblot)方法檢測(cè)肺組織勻漿RORgamma

5、t蛋白表達(dá)水平，免疫熒光雙標(biāo)方法檢測(cè)Th17細(xì)胞在肺泡壁、小氣道壁、肺小動(dòng)脈壁的表達(dá)。分析肺組織勻漿中RORgammatRNA表達(dá)水平與IL-17蛋白水平及FEV1占預(yù)計(jì)值百分比相關(guān)性；分析肺組織中Th17細(xì)胞與肺氣腫、小氣道病理總積分、肺小動(dòng)脈管壁厚度，及與IL-17+、CD4+T淋巴細(xì)胞之間相關(guān)性。
　　 結(jié)果：（略）
　　 結(jié)論：Th17細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子RORgammatmRNA及蛋白水平在正常吸煙者的肺組織已經(jīng)

6、開(kāi)始增高，COPD患者更為顯著，并與IL-17蛋白含量密切相關(guān)；Th17細(xì)胞表達(dá)增強(qiáng)并與IL-17+細(xì)胞、CD4+T淋巴細(xì)胞及肺組織破壞、氣道和肺動(dòng)脈炎癥與重構(gòu)、氣流受限密切相關(guān)。結(jié)果提示CD4+T淋巴細(xì)胞參與吸煙者和COPD患者肺部炎癥免疫反應(yīng)，肺組織中Th17處于增殖活化狀態(tài)，并分泌IL-17參與并促進(jìn)肺部炎癥反應(yīng)。
　　 第三部分Th17細(xì)胞及相關(guān)因子參與肺功能正常吸煙者和COPD患者肺部炎癥的相關(guān)機(jī)制
　　 目的

7、:觀(guān)察Th17細(xì)胞活化的上游因子IL-23受體(IL-23R)，CC趨化因子受體6(CCR6)及其分泌的相關(guān)因子IL-17、IL-21在肺組織的表達(dá)及意義，探討Th17細(xì)胞在COPD肺部炎癥中活化及放大炎癥反應(yīng)的可能機(jī)制。
　　 方法:實(shí)驗(yàn)病例入選及分組同第一章。肺組織蠟塊病理切片免疫組化技術(shù)檢測(cè)肺泡壁1L-17，IL-23R，CCR6的表達(dá)，并分析三者之間及與Th17細(xì)胞之間的相關(guān)性。熒光定量PCR檢測(cè)肺組織勻漿IL-21mR

8、NA、1L-17mRNA含量，并分析二者之間，以及與RORγtmRNA和FEV1的相關(guān)關(guān)系。分析肺泡壁、氣道壁、肺動(dòng)脈壁Th17細(xì)胞與CD8+T細(xì)胞的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：（略）
　　 結(jié)論：肺功能正常吸煙者和COPD患者肺泡壁中IL-17、IL-23R、CCR6表達(dá)顯著增高并與Th17細(xì)胞數(shù)呈顯著正相關(guān)，在肺泡壁、氣道、肺動(dòng)脈中Th17細(xì)胞數(shù)與CD8+淋巴細(xì)胞均有顯著正相關(guān)，Th17細(xì)胞相關(guān)因子IL-21、1L-17在