秦皮中秦皮乙素的提取及衍生化與抗腫瘤活性研究.pdf

1、秦皮為常用中藥，是木犀科植物白蠟樹的干燥枝皮或干皮，主產(chǎn)于我國東北、華北、華西等地區(qū)。秦皮乙素是中藥秦皮的主要有效成分，化學名為6，7-二羥基香豆素，具有抗腫瘤、抗炎鎮(zhèn)痛、抗氧化，保護中樞神經(jīng)系統(tǒng)等多種藥理活性，因此秦皮乙素具有廣闊的藥用開發(fā)前景。在藥物化學里，天然產(chǎn)物固有的生物活性十分重要，并具有明確的靶點作用，可通過藥物合成和設計獲得具有更高藥理活性的衍生物并滿足藥物分子庫的結(jié)構(gòu)多樣性。秦皮乙素結(jié)構(gòu)中的6，7-二酚羥基是重要的反應活

2、性位點，可在該位置引入取代基團或官能團對其進行化學修飾，通過化學反應衍生化獲得結(jié)構(gòu)新穎且具有更高活性的秦皮乙素衍生物。
　　基于以上，本課題以秦皮乙素為對象，對其提取分離，衍生化及秦皮乙素衍生物的抗腫瘤活性進行了研究。從秦皮中提取得到秦皮乙素并通過液液萃取和重結(jié)晶分離純化得到高純度的秦皮乙素?；陔s合體理論的設計方法，將秦皮乙素與肉桂酸、水楊酸等化合物進行酯化，進一步得到新的秦皮乙素衍生物并通過MTT法研究其對人肝癌HepG2、人

3、結(jié)腸癌HCT-116細胞系的抗腫瘤活性。研究結(jié)果如下:
　　1.研究了秦皮乙素的提取分離工藝。采用乙醇回流法對秦皮中的秦皮乙素進行提取，以秦皮乙素含量為指標，通過單因素試驗和正交試驗優(yōu)化秦皮乙素的提取條件。結(jié)果表明:在乙醇濃度75％、提取料液比1∶7、提取3次、提取時間2h時，秦皮乙素含量最高，在此工藝條件下的秦皮乙素含量為1.83 mg/g。采用液液萃取和重結(jié)晶對最佳提取工藝下的秦皮乙素提取液分離純化。通過液液萃取得到秦皮乙素粗

4、品，再將秦皮乙素粗品經(jīng)重結(jié)晶得到純度較高的秦皮乙素單體，并以秦皮乙素純度和收率為綜合指標，通過單因素實驗優(yōu)化了秦皮乙素單體的重結(jié)晶工藝。結(jié)果表明:最佳提取條件為醇水比1∶3。在該條件下得到的秦皮乙素純度為98.38％，收率為39.7％。
　　2.以秦皮乙素的基本結(jié)構(gòu)為母核對其7位羥基部分進行酯化修飾，與柱層析色譜對其進行分離純化，其結(jié)構(gòu)通過1HNMR、13C NMR手段表征，確證為目標秦皮乙素衍生物的結(jié)構(gòu)。
　　3.研究了1

5、0個秦皮乙素衍生物對腫瘤細胞增殖的抑制作用，同時以秦皮乙素為對照。實驗結(jié)果表明，6種秦皮乙素衍生物的抑制人肝癌細胞HepG2增殖作用高于秦皮乙素，5種秦皮衍生物的抑制人結(jié)腸癌細胞HCT-116增殖作用高與秦皮乙素。秦皮乙素與肉桂酸類化合物酯化得到的秦皮乙素衍生物活性優(yōu)于合成的其他6種秦皮乙素衍生物，且在1～100μmol/L范圍內(nèi)呈現(xiàn)較好的劑量依賴性。其中(E)-6-羥基-2-氧代-7-色烯-3-（3，4-二甲氧基苯基）丙烯酸酯(45)