秦皮甲素提取純化工藝及降尿酸作用研究.pdf

1、一、目的:
　　探索秦皮甲素的提取、分離和純化工藝，并研究其對慢性高尿酸血癥模型小鼠尿酸水平和腎功能的影響。
　　二、方法:
　　1.秦皮甲素熱浸提工藝研究
　　通過單因素實驗和正交實驗探討從秦皮中浸提秦皮甲素的最佳工藝，考察乙醇浸提過程中乙醇濃度、料液比、浸提時間、浸提次數(shù)以及浸提溫度對秦皮甲素轉(zhuǎn)移率的影響。
　　2.秦皮甲素純化工藝研究
　　采用大孔樹脂和重結(jié)晶相結(jié)合的方法分離純化秦皮提取液中的秦

2、皮甲素。通過HPD100、HPD400、HPD500、D101、ADS-7、ADS-17、AB-8這七種大孔吸附樹脂對秦皮甲素的純化效果進行靜態(tài)實驗和動態(tài)實驗考查，探索純化秦皮甲素最適合的樹脂和最佳的上樣條件。
　　3.秦皮甲素對慢性高尿酸血癥模型小鼠尿酸水平的影響研究
　　36只昆明種雄性小鼠飼養(yǎng)一周后，隨機平均分為6組，依次為空白組、模型組、秦皮甲素高(200mg/kg)、中（100mg/kg）、低(50mg/kg)劑量

3、組以及陽性藥物別嘌醇對照組（50mg/kg）。模型組、陽性對照組、秦皮甲素高中低劑量組給予黃嘌呤600mg/kg(ig.)+氧嗪酸鉀100mg/kg(ip.)造模，空白組給予同等劑量生理鹽水。秦皮甲素高、中、低劑量組采用秦皮甲素混懸液進行灌胃給藥，陽性對照組灌胃給予別嘌醇混懸液50mg/kg，模型組和空白組則灌胃給予同等體積的生理鹽水，連續(xù)7日。于第七日下午給藥1h后，摘眼球取各組動物的血樣，離心吸取血清采用全自動生化分析儀檢測血中尿酸

4、(BUA)、肌酐(CR)和尿素氮(BUN)值，考察秦皮甲素對慢性高尿酸血癥模型小鼠BUA、CR、BUN的影響以及對小鼠腎功能的影響。
　　三、結(jié)果:
　　1.秦皮甲素乙醇浸提工藝研究
　　通過比較各因素對秦皮甲素轉(zhuǎn)移率的影響，秦皮甲素最佳的浸提工藝條件為:乙醇濃度75％，料液比為1∶10，浸提溫度為65℃，浸提次數(shù)為2次，浸提時間為2h/次。
　　2.秦皮甲素純化工藝研究
　　根據(jù)實驗結(jié)果，本課題選用樹脂A

5、DS-7為分離純化秦皮甲素的最佳分離樹脂。最佳上樣條件為:上樣濃度為0.192 mg/mL，最大上樣量為4.02mg/g，先以3倍柱體積(3BV)的水洗去雜質(zhì)，再用30％的乙醇進行洗脫，收集30％乙醇洗脫液的前半部分，放入冰箱中冷藏保存24小時，重結(jié)晶后過濾，室溫下放置干燥，秦皮甲素純度可達到97％以上。
　　3.秦皮甲素對慢性高尿酸血癥模型小鼠尿酸水平的影響研究
　　結(jié)果顯示模型組和空白組相比，小鼠的BUA明顯升高，差異具

6、有顯著性(P＜0.01)，提示造模成功。與模型組比較，秦皮甲素高、中、低劑量組均能顯著降低高尿酸血癥模型小鼠的BUA值，且秦皮甲素中、高劑量組能夠?qū)⒏吣蛩嵫Y模型小鼠的BUA值降低到正常值以下，其抑制率分別為63.45％和80.69％。模型組CR高于空白組，差異具有顯著性(P＜0.01)，秦皮甲素高、中、低劑量組CR略高于空白組，差異無顯著性。模型組、秦皮甲素高、中、低劑量組與空白組相比，BUN差異均無顯著性。陽性對照別嘌醇組小鼠的CR