高脂飲食C57BL-6J小鼠脂肪組織Ym-1蛋白表達的研究.pdf

1、目的：動態(tài)觀察高脂飲食誘導的肥胖小鼠肝臟及脂肪組織病理結(jié)構(gòu)、生化指標、M2型巨噬細胞特異性活化標志Ym-1蛋白的變化,探討巨噬細胞選擇性活化與肥胖相關性胰島素抵抗間的關系。
　　方法：28只3周齡雄性C57BL/6J小鼠,隨機平均分為2組:普食組(A組n=14只),高脂飲食組(B組n=14只),分別給予標準飼料與高脂飼料喂養(yǎng)。6周、12周分別檢測空腹血糖((fasting peripheral blood glucose,FBG)

2、、血漿胰島素((fasting plasma insulin,FINS)水平,并計算胰島素抵抗指數(shù)(insulinresistance index,HOMA-IR),測定肝組織勻漿甘油三酯(triglyceride,TG)、膽固醇(cholesterol,TC)及谷丙轉(zhuǎn)氨酶(glutamic pyruvic transaminase,ALT)水平;HE染色觀察肝臟及脂肪組織病理學改變,DAB染色及免疫熒光染色檢測小鼠肝臟、脂肪組織M2型

3、巨噬細胞的特異性蛋白Ym-1表達情況。
　　結(jié)果：
　　1.喂養(yǎng)6周、12周后,B組小鼠體重均較A組增加,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05,P<0.01)。
　　2.喂養(yǎng)6周后,A組、B組的FBG均在正常范圍之內(nèi),無明顯差異(P>0.05);B組的FINS、HOMA-IR升高,較A組有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。喂養(yǎng)12周后,B組的FBG、FINS、HOMA-IR進一步升高且明顯高于A組(P<0.01)。
　　3.

4、喂養(yǎng)6周后,B組肝組織勻漿TC水平較A組升高,有統(tǒng)計學意義(P<0.01);A組、B組肝組織勻漿TG水平比較無統(tǒng)計學意義(P>0.05);B組肝組織勻漿ALT水平較A組有升高趨勢,但無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。喂養(yǎng)12周后,B組肝組織勻漿TC、TG水平進一步升高,較A組有統(tǒng)計學意義(P<0.01);B組肝組織勻漿ALT水平較A組升高,有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
　　4.喂養(yǎng)6周后,A組小鼠肝臟顏色鮮紅,表面光滑;B組小鼠肝臟

5、體積增大不明顯,顏色略黃,可見黃色脂肪斑。喂養(yǎng)12周后,A組小鼠肝臟無明顯異常,顏色鮮紅,表面光滑;B組小鼠肝臟呈黃色、邊緣變鈍、油膩感,可見黃色脂肪斑且體積增大明顯。
　　5.喂養(yǎng)6周后,A組小鼠肝組織HE染色未見明顯異常;B組小鼠肝細胞內(nèi)可見彌漫分布的微脂滴。喂養(yǎng)12周后,A組小鼠肝組織HE染色未見明顯異常;B組小鼠肝細胞彌漫分布的微脂滴更加明顯,可見肝細胞氣球樣變。
　　6.喂養(yǎng)12周后,A組小鼠腹部脂肪組織HE染色示

6、脂肪細胞大小形態(tài)正常,可見少量炎性細胞浸潤;B組小鼠腹部脂肪細胞HE染色示脂肪細胞體積明顯增大,脂肪細胞壁不完整,炎性細胞數(shù)量較A組增多。
　　7.喂養(yǎng)6周、12周后,A組、B組肝組織DAB染色及免疫熒光染色均未見Ym-1蛋白的表達。
　　8.喂養(yǎng)12周后,A組DAB染色及免疫熒光染色均表明正常組脂肪組織可見少量M2型巨噬細胞表達,B組M2型巨噬細胞/脂肪細胞較A組增多,兩組比較有統(tǒng)計學意義(P<0.05);DAB染色及免疫

7、熒光累積光密度結(jié)果表明B組M2型巨噬細胞Ym-1蛋白表達較A組有統(tǒng)計學意義(P<0.01);且脂肪組織Ym-1蛋白DAB染色累積光密度與FBG、FINS、HOMA-IR呈正相關(P<0.01),Ym-1蛋白免疫熒光染色累積光密度與FINS、HOMA-IR呈正相關(P<0.01),與FBG無相關性(P>0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.高脂飲食可使C57BL/6J小鼠體重增加,升高FBG、FINS、TC、TG、ALT水平,HO