泰山磐石散干預(yù)流產(chǎn)大鼠模型的相關(guān)免疫機制研究.pdf

1、目的:
　　用具有益氣健脾、養(yǎng)血安胎功效的泰山磐石散干預(yù)流產(chǎn)模型的SD大鼠，觀察孕鼠外周血中細胞因子IFN-γ、IL-2、IL-10的變化，以及母胎界面蛻膜組織中TNF-α的表達分布情況，為闡述泰山磐石散治療流產(chǎn)的機制提供實驗依據(jù)，為保胎中藥的開發(fā)奠定理論基礎(chǔ)。
　　方法:
　　選取正常的15只SPF級的SD雄鼠和30只SPF級的SD雌鼠，然后將雄鼠和雌鼠按照雄:雌為1:2分配，合為一籠。將孕鼠隨機分為3組，即正常組、

2、模型組、干預(yù)組，每組10只孕鼠。正常組的孕鼠從妊娠的第1～11天給予蒸餾水灌胃10ml/kg/d，妊娠的第6～8天皮下注射75％的乙醇溶液1ml/kg/d;模型組的孕鼠從妊娠的第1～11天給予蒸餾水灌胃10ml/kg/d，妊娠的第6～8天皮下注射溴隱亭（溶于75％的乙醇溶液）0.4mg/kg/d;干預(yù)組的孕鼠從妊娠的第1～11天給予泰山磐石散灌胃10ml/kg/d，妊娠的第6～8天皮下注射溴隱亭0.4mg/kg/d;妊娠的第12天用20

3、％的烏拉坦溶液腹腔注射麻醉孕鼠，剖開腹腔后腹主動脈采血，離心得血清，酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測血清中IFN-γ、IL-2、IL-10的水平;取出胎盤蛻膜組織，用4％的多聚甲醛固定后，免疫組織化學(xué)技術(shù)與圖像定量分析TNF-α在母胎界面的表達情況。
　　結(jié)果:
　　1.正常組、模型組、干預(yù)組的流產(chǎn)率依次為0％、80％、20％，模型組的流產(chǎn)率明顯高于正常組和干預(yù)組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01和P＜0.05);正常組和干預(yù)組比較，無

4、顯著性差異(P＞0.05)。
　　2.正常組、模型組、干預(yù)組血清中IFN-γ的含量依次為9.15±3.01 pg/ml、13.78±2.79 pg/ml、10.57±2.24 pg/ml，模型組明顯高于正常組和干預(yù)組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01和P＜0.05)，正常組和干預(yù)組比較，無顯著性差異(P＞0.05)。
　　3.正常組、模型組、干預(yù)組血清中IL-2的含量依次為3.40±0.63 pg/ml、3.86±1.49

5、pg/ml、2.11±0.51 pg/ml，正常組和模型組的含量明顯高于干預(yù)組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05和P＜0.01），正常組和模型組比較，無顯著性差異(P＞0.05)。
　　4.正常組、模型組、干預(yù)組血清中IL-10的含量依次為17.10±8.68 pg/ml、8.54±5.01pg/ml、9.07±4.57 pg/ml，正常組的含量明顯高于模型組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，模型組和干預(yù)組比較，無顯著性差異(

6、P＞0.05)。
　　5.正常組、干預(yù)組的TNF-α在母胎界面兩側(cè)的表達分布子宮側(cè)明顯比胎盤側(cè)表達量少，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。模型組的TNF-α在母胎界面兩側(cè)的表達分布子宮側(cè)和胎盤側(cè)相比，無顯著性差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.溴隱亭致流產(chǎn)模型孕鼠的血清中IFN-γ高表達和IL-10低表達，TNF-α在母胎界面的異常表達分布，提示了IFN-γ、IL-10、TNF-α可能與流產(chǎn)的發(fā)生具有相關(guān)性。