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1、目的:通過熒光定量PCR實(shí)驗(yàn),檢測(cè)右歸丸對(duì)腎陽(yáng)虛干預(yù)前后免疫類基因定量表達(dá)差異,部分闡釋右歸丸干預(yù)腎陽(yáng)虛證的分子機(jī)制,為老齡腎陽(yáng)虛的防治提供科學(xué)依據(jù)。
方法:⑴經(jīng)古今文獻(xiàn)梳理,概括腎陽(yáng)的生理功能及腎陽(yáng)虛證的常見臨床表現(xiàn);課題組對(duì)采用右歸丸治療獲效的常見疾病進(jìn)行了總結(jié)。⑵對(duì)課題組前期老齡腎陽(yáng)虛與健康對(duì)照的人全基因組芯片數(shù)據(jù),采用3DPCA聚類分析,獲得老齡腎陽(yáng)虛證差異基因表達(dá)譜,結(jié)合基因生物學(xué)功能的分析,刪選免疫類差異表達(dá)基因。
2、⑶納入老齡腎陽(yáng)虛體質(zhì)者,給予右歸丸治療28天,采用腎陽(yáng)虛半定量診斷標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)療效。⑷采用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)右歸丸對(duì)老齡腎陽(yáng)虛干預(yù)前后免疫類基因定量表達(dá)水平差異。
結(jié)果:①右歸丸理法方藥切合腎陽(yáng)虛證病機(jī),對(duì)男科、婦科、骨科、內(nèi)分泌、顱腦等多種疾病均有良好療效,在臨床有較廣泛的應(yīng)用。②基于前期腎陽(yáng)虛證差異基因表達(dá)譜,篩選到28條免疫基因用于檢測(cè)右歸丸干預(yù)前后基因定量表達(dá)差異。③納入老齡腎陽(yáng)虛17例,經(jīng)右歸丸干預(yù),15例腎陽(yáng)虛病人的
3、臨床表現(xiàn)明顯改善,總有效率88.2%。④有1條基因NCOA2在右歸丸對(duì)腎陽(yáng)虛干預(yù)前后有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的顯著性,有6條基因FHIT、COL13A1、IRAK2、SSTR5、TIAM2、PTGER1有較顯著的差異趨勢(shì)。
結(jié)論:⑴右歸丸對(duì)辨證為腎陽(yáng)虛證的各類疾病有著廣泛的應(yīng)用和確切的療效,是溫補(bǔ)腎陽(yáng)的效方。⑵在服用右歸丸干預(yù)前后,有1條基因有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著差異,有6條基因有較明顯的差異表達(dá)趨勢(shì)。⑶7條差異基因除參與免疫反應(yīng)外,還參與生殖發(fā)育
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