IL-12-IFN-γ軸基因多態(tài)性與EV71感染手足口病易感性相關研究.pdf

1、目的：研究IL-12/IFN-γ軸上五個基因的單核苷酸多態(tài)性與EV71感染手足口?。╤and，foot and mouth disease，HFMD）易感性的關系，這五個基因包括：白介素12B（IL-12B），白介素12受體β1（IL-12RB1），信號轉導及轉錄激活因子4（STAT4），干擾素γ受體2（IFNGR2），信號轉導及轉錄激活因子1（STAT1）。
　　方法：2014年3月至2015年6月，收集廣西地區(qū)EV71感染HF

2、MD患兒145例、EV71隱性感染兒童104例、健康對照兒童89例。采集非抗凝血提取血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定血清標本EV71 IgM、IgG及CoxA16 IgM、IgG抗體。采集抗凝血提取其外周血DNA，采用改進的多重高溫連接酶檢測反應技術（imLDRTM）檢測三組人群IL-12/IFN-γ軸上27個單核苷酸多態(tài)性位點：IL-12B基因一個位點：rs2288831；IL-12RB1基因11個位點：rs12461312

3、，rs17882555，rs1870063，rs2305740，rs2305741，rs17878265，rs3746190，rs375947，rs383483，rs391410，rs401502；STAT4基因七個位點：rs11676659，rs1517351，rs3024866，rs3024891，rs3024900，rs3024903，rs7574865；IFNGR2基因一個位點：rs9808753；STAT1基因七個位點：rs1

4、17037705，rs2066804，rs2280235，rs397897569，rs45515791，rs7597768，rs77910835的單核苷酸多態(tài)性，統(tǒng)計各個位點的基因型及等位基因頻率，并分析各個位點基因型及等位基因分布與EV71感染HFMD易感性之間的關系。
　　結果：⑴EV71感染HFMD組與對照組比較，IL-12RB1基因六個位點（rs12461312，rs17882555,1870063，rs2305740，r

5、s2305741，rs3746190）的基因型及等位基因頻率分布差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05），IL-12RB1基因rs12461312等位基因C、rs17882555等位基因G、rs1870063等位基因C、rs2305740等位基因A、rs2305741等位基因G、rs3746190等位基因G頻率顯著高于對照組；EV71隱性感染組與正常對照組比較，IL-12RB1基因的這六個多態(tài)性位點的基因型頻率及等位基因頻率分布差異均無統(tǒng)計學

6、意義（P>0.05）；EV71感染HFMD組和EV71隱性感染組比較，這些多態(tài)性位點基因型及等位基因均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。⑵EV71感染HFMD組和正常對照組比較，STAT4基因位點rs11676659的基因型差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05），EV71感染HFMD組基因型AA頻率低于對照組，而STAT4基因rs11676659等位基因頻率差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；EV71隱性感染組與對照組比較，rs11676659多

7、態(tài)性位點的基因型頻率及等位基因頻率分布差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；EV71感染HFMD組和EV71隱性感染組比較，STAT4位點rs11676659基因型差異具有統(tǒng)計學意義（P=0.049），EV71感染HFMD組基因型AA頻率低于隱性感染組，其等位基因頻率分布無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。⑶EV71感染HFMD組和EV71隱性感染組分別與對照組比較，IFNGR2基因位點rs9808753的基因型及等位基因頻率差異均具有統(tǒng)計學意

8、義（P<0.05），EV71感染HFMD組和EV71隱性感染組基因型AA及A等位基因頻率均顯著高于對照組；EV71感染HFMD組和EV71隱性感染組比較，該多態(tài)性位點的基因型及等位基因均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。⑷IL-12RB1基因rs3746190(A/G)，rs12461312(A/C)，rs17882555(A/G)，rs1870063(C/T)，rs2305740(A/G)，rs2305741(A/G)六個多態(tài)性位點經過連

9、鎖不平衡檢測示：這六個多態(tài)性位點具有較強的連鎖不平衡（D’>0.8并且r2>0.8），處于同一個連鎖框內，可進行單倍型分析。EV71感染HFMD組和對照組比較，IL-12RB1基因這六個SNP位點單倍型AAATGA在EV71感染HFMD組中低于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義[P=0.0044<0.05，OR（95％CI）：0.397（0.207-0.762）]，單倍型GCGCAG在EV71感染HFMD組顯著高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義[P

10、=0.017，OR（95%CI）：2.116（1.131-3.956）]。⑸EV71感染HFMD組和對照組比較，IL-12RB1基因位點rs375947，rs383483，rs391410，rs401502的等位基因頻率分布均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05），在EV71感染HFMD組中位點rs375947等位基因A、位點rs383483等位基因A、位點rs391410等位基因G、位點rs401502等位基因C頻率均高于對照組，這四個位點基

11、因型分布差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；EV71隱性感染組和對照組比較，及EV71感染HFMD組和EV71隱性感染組比較，這四個位點基因型及等位基因頻率差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；EV71感染HFMD組、EV71隱性感染組分別和正常對照組比較，及EV71感染HFMD組和EV71隱性感染組比較，其余單核苷酸多態(tài)性位點基因型及等位基因的頻率分布差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　結論：①IL-12RB1基因六個位點（

12、rs12461312，rs17882555,1870063，rs2305740，rs2305741，rs3746190）的多態(tài)性可能與EV71感染HFMD易感性有關，與這些位點相對應的基因型及等位基因 CC/C、GG/G、CC/C、AA/A、GG/G、GG/G均是EV71感染HFMD的危險因素；②STAT4基因位點rs11676659的多態(tài)性可能與EV71感染HFMD易感性有關，基因型AG+GG及等位基因G是EV71感染HFMD的危險因

13、素；③IFNGR2基因位點rs9808753的基因多態(tài)性與EV71感染易感性有關，基因型AA及等位基因A是EV71感染的危險因素；④IL-12RB1基因位點rs3746190，rs12461312，rs17882555，rs1870063，rs2305740，rs2305741單倍型GCGCAG是EV71感染HFMD危險因素，攜帶單體型GCGCAG的兒童患EV71感染HFMD的風險更高；⑤IL-12RB1基因四個位點rs375947、r

14、s383483、rs391410、rs401502的等位基因可能與EV71感染HFMD易感性有關；IL-12B基因位點rs2288831，STAT4基因五個位點rs3024866、rs3024891、rs3024900、rs3024903、rs7574865，STAT1基因七個位點rs117037705、rs2066804、rs2280235、rs397897569、rs45515791、rs7597768、rs77910835的單核苷