高血糖對大鼠腦缺血再灌注ICAM-1、TNF-α表達及白細胞浸潤的研究.pdf

1、目的:缺血性腦卒中是高致死率、高致殘率疾病.臨床和動物實驗證實高血糖與缺血性腦卒中關(guān)系密切,但糖尿病、高血糖、高血糖控制和腦卒中結(jié)果之間的關(guān)系還存在爭議.高血糖加重腦缺血后神經(jīng)損傷機制包括無氧代謝的增強致酸中毒;興奮性氨基酸毒性作用;高血糖破壞血腦屏障,促進梗死后出血轉(zhuǎn)化;一氧化氮的毒性作用.其中最常見的是酸中毒學(xué)說,但是有學(xué)者持反對意見.該研究觀察高血糖條件下腦缺血再灌注后細胞間粘附分子(intercellular adhesion

2、molecule-1,ICAM-1)和腫瘤壞死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)表達及白細胞浸潤情況,探索高血糖對腦缺血再灌注影響的可能機制.方法:36只雄性SD大鼠(體重180-220g)隨機分成3組:正常血糖組(n=16)、高血糖組(n=16)和假手術(shù)組(n=4),其中高血糖組和正常血糖組按再灌注2h、4h、6h和24h分為4個亞組.假手術(shù)組:頸部正中切口,暴露頸總動脈后縫全皮膚.觀察組:高血糖組

3、采用缺血前30分鐘腹腔注射葡萄糖建立高血糖模型(正常血糖組腹腔注射等量生理鹽水).用Longa--Zea氏線栓法復(fù)制腦缺血再灌注模型,10﹪水合氯醛(30-40mg/Kg)腹腔注射麻醉大鼠,手術(shù)分離并結(jié)扎右側(cè)頸外動脈、頸總動脈,在頸總動脈分叉處的下方剪一小口,經(jīng)此小口插入備好的線栓(直徑0.20mm高彈力魚線,插線頭燒成圓頭,臨用時蘸取肝素),經(jīng)頸內(nèi)動脈入顱至大腦前動脈,結(jié)扎頸內(nèi)動脈,縫全皮膚.缺血2小時后拔出線栓.分別于再灌注后2h、

4、4h、6h和24h(每個小組4只)處死動物,迅速斷頭取全腦速凍15min,行冠狀切片,用2﹪紅四氮唑(TTC)染色后拍照,用圖像分析系統(tǒng)測量梗死體積.免疫組織化學(xué)法和HE染色觀察不同再灌注時間點TNF-α、ICAM-1陽性表達及白細胞浸潤計數(shù).分別比較高血糖組和正常血糖組不同再灌注時間點TNF-α、ICAM-1表達和白細胞浸潤計數(shù);比較相同再灌注時間點高血糖組和正常血糖組TNF-α、ICAM-1表達和白細胞浸潤計數(shù).結(jié)論:ICAM-1、