急性創(chuàng)傷性凝血病大鼠模型的建立.pdf

1、背景：
　　在世界范圍內，創(chuàng)傷是引起人類死亡的第二大原因。雖然建立了區(qū)域性急救體系并且在創(chuàng)傷治療方面有所提高，但是死亡率仍居高不下。創(chuàng)傷所致的凝血障礙約占創(chuàng)傷后死因的40％。急性創(chuàng)傷性凝血?。═rauma induced coagulopathy,TIC）的發(fā)病機制復雜，涉及多個系統(tǒng)。急性創(chuàng)傷性凝血病并非簡單的消耗性凝血障礙，而是涉及凝血系統(tǒng)、纖溶系統(tǒng)、組織灌注、炎癥反應及血管內皮功能等多個系統(tǒng)動態(tài)平衡的紊亂。但具體機制仍不明確，

2、存在多種假說。因此，建立急性創(chuàng)傷性凝血病小動物模型有利于對其機制進一步深入研究從而指導臨床。本實驗，我們通過對大鼠進行人為多發(fā)傷，建立了急性創(chuàng)傷凝血病模型，并探討了顱腦外傷（Traumatic brain injury，TBI）后凝血功能異常與銅代謝紊亂的可能關系。
　　方法：
　　1、大鼠股動脈插管采血模型的建立：
　　SD（Sprague-Dawley，SD）大鼠，無菌條件下分離股動脈，結扎遠心端、夾閉近心端、剪口

3、、插管、連接三通閥，監(jiān)測血壓及連續(xù)采集動脈血。
　　2、TIC模型建立：
　　SD大鼠，外科開放氣道，行左側頸動脈及股動脈插管，持續(xù)監(jiān)測血壓并通過股動脈導管連續(xù)采血。模型制作：使用止血鉗對肝臟中右葉、小腸及右下肢骨骼肌鉗夾，行右側脛腓骨骨折，合并失血性休克。大鼠處死后損傷組織做 HE（Hematoxylin-eosin，HE）染色觀察病理變化，右下肢正斜位片觀察骨折情況。每隔30min采血一次，進行連續(xù)凝血功能測定及血小板監(jiān)

4、測。
　　3、顱腦創(chuàng)傷凝血病模型的建立
　　采用自由落體顱腦外傷打擊模型。打擊完畢予頸動脈插管、氣管插管及股動脈插管。每隔30min采血一次，進行連續(xù)凝血功能測定及血小板監(jiān)測。此外，實驗結束取大鼠腦組織通過HE染色進行組織學觀察，石墨爐原子吸收光譜法測定血漿中總銅（Cu）。
　　結果：
　　經股動脈插管可同時實現(xiàn)短時連續(xù)多次采血及血壓監(jiān)測。大鼠行多發(fā)傷處理后，APTT（Activated partial thro

5、mboplastin time，APTT）較0時刻點及空白對照組有明顯延長趨勢，血小板總體呈降低趨勢，PT（Prothrombin time，PT）及INR（International normalized ratio，INR）變化不明顯。HE染色顯示大鼠肝臟、小腸明顯的出血，部分肝細胞呈空泡樣變甚至壞死，骨骼肌纖維斷裂，細胞水腫，少量細胞核消失。大鼠顱腦外傷模型結果表明，TBI后 APTT延長，血小板計數減少，且血漿總銅濃度水平降低。