HNRPDL在腫瘤細胞中的功能研究.pdf

1、目的：研究HNRPDL（Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein D-like）在結(jié)腸癌及慢性髓細胞白血病（Chronic myeloid leukemia，CML）細胞中的功能。
　　方法：⑴構(gòu)建過表達HNRPDL和干擾其表達的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體并制備病毒侵染SW620、K562等腫瘤細胞，Q-RT-PCR和western blot檢測HNRPDL的表達情況；⑵干預HNRPDL表達后研究它對細胞

2、增殖、遷移、周期、集落生成和致瘤能力的影響；⑶使用K562細胞研究HNRPDL對其伊馬替尼（Imatinib mesylate，IM）反應性的影響；⑷在BaF3細胞中共表達BCR/ABL和HNRPDL，比較共表達與單獨表達對細胞增殖和集落生成的影響。
　　結(jié)果：①結(jié)腸癌樣本中HNRPDL的表達明顯高于對照樣本。干擾HNRPDL的表達后，結(jié)腸癌細胞SW620的增殖、集落生成和遷移能力減弱，且在裸鼠皮下成瘤能力也降低（對照組：8/8；

3、HNRPDL沉默組：5/8）。②細胞周期分析顯示：干擾HNRPDL表達的SW620細胞與對照相比G0/G1期細胞增加，G2/M期細胞減少。③Western blot分析顯示HNRPDL沉默抑制SW620細胞中cyclin D3的表達。④慢性髓細胞白血病患者骨髓中HNRPDL的表達較正常骨髓顯著升高；沉默HNRPDL顯著抑制CML細胞株（K562、MEG-01和BV173）和患者CD34+細胞的生長；也顯著抑制了MEG-01細胞的裸鼠皮下

4、成瘤能力（對照：6/8；shHNRPDL＃1：1/8；shHNRPDL#2組：0/8）。⑤過表達HNRPDL促進BaF3細胞的生長及集落生成能力，并且能夠減少BaF3細胞對mIL-3的依賴。HNRPDL也增強K562細胞的體外增殖。HNRPDL和BCR/ABL共表達細胞的生長較單獨基因表達細胞顯著增強。⑥HNRPDL沉默增加細胞對IM的敏感性，而過表達HNRPDL增加細胞對IM的耐受性。
　　結(jié)論：⑴HNRPDL在結(jié)腸癌樣本中異常