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文檔簡介
1、目的:研究青黛有效成分在體外對HEL(humanerythroleukemia)細胞的增殖、凋亡和分化的作用;
方法:1.青黛有效成分提?。翰捎么继岱ㄌ崛∏圜煊行С煞?,溶解于二甲亞砜配制初始濃度為10mg/mL。2.細胞培養(yǎng):HEL細胞用含10%小牛血清的RPMI1640液體培養(yǎng)基37C,5%CO2常規(guī)培養(yǎng)。3.MTT還原實驗:取生長狀態(tài)良好的HEL細胞,調(diào)整細胞密度為0.5×106~1×106/mL,與不同濃度青黛提取物
2、藥液混合培養(yǎng),觀察青黛有效成分對HEL細胞的增殖抑制效應。4.光學顯微鏡下觀察青黛有效成分作用前后HEL細胞的形態(tài)學改變;5.凋亡檢測:流式細胞術(shù)AnnexinV-FITC/PI雙標記法檢測青黛有效成分對HEL細胞的早期凋亡誘導作用。6.細胞分化檢測:流式細胞術(shù)檢測HEL細胞CD14和CD11b的表達情況,觀察HEL細胞單核系分化趨勢;
結(jié)果:1.MTT結(jié)果顯示25,50,75及100μg/mL藥物對HEL細胞的生長抑制率
3、分別為16.01%,39.12%,50.06%和59.28%(P均<0.01);2.光學顯微鏡下觀察青黛有效成分作用后,部分HEL細胞的形態(tài)呈凋亡改變;3.青黛有效成分可誘導HEL細胞早期凋亡:25,50,75及100μg/mL藥物對應的HEL早期凋亡率分別是5.60%,13.7%,17.8%和18.4%,明顯高于對照細胞的自發(fā)凋亡率(2.70%);4.與陰性對照組相比25,50,75和100μg/mL青黛有效成分作用下HEL細胞均出現(xiàn)
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