2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:通過體外培養(yǎng)和裸鼠皮下移植人肝癌SMMC-7721細(xì)胞,觀察綠茶提取物EGCG單體對(duì)人肝癌細(xì)胞株SMMC-7721體內(nèi)外增殖、凋亡的影響,并探討可能的作用機(jī)制。擬為綠茶提取物用于臨床肝癌治療提供理論依據(jù),也可能為肝癌治療提供新的思路和新的方法。 方法: 1.體外復(fù)蘇、培養(yǎng)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞并采用不同濃度的EGCG單體溶液對(duì)其進(jìn)行干預(yù)。將對(duì)數(shù)生長期的人肝癌SMMC-7721細(xì)胞,以3.6×103/孔的密度接

2、種于96孔板,待細(xì)胞貼壁后加入EGCG單體溶液,使EGCG單體終濃度為10μg/ml、40μg/ml、80μg/ml,繼續(xù)培養(yǎng),分別于24h、48h、72h用。MTT法觀測EGCG單體溶液對(duì)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞增殖能力的影響,按公式:抑制率(inhibition ratio,IR)=[1-(實(shí)驗(yàn)組平均A570值-空白組A570)/(對(duì)照組平均A570值-空白組A570)]×100%計(jì)算IR;將對(duì)數(shù)生長期的人肝癌SMMC-7721

3、細(xì)胞,以2.7×104/孔的密度接種于24孔板,待細(xì)胞貼壁后分別加入EGCG單體溶液,使EGCG單體終濃度為10μg/ml、40μg/ml、80μg/ml,繼續(xù)培養(yǎng)72h,用免疫細(xì)胞化學(xué)法結(jié)合圖象分析技術(shù)檢測人肝癌SMMC-7721細(xì)胞中Ki67的表達(dá)變化;將對(duì)數(shù)生長期的人肝癌SMMC-7721細(xì)胞,以5.4×105/孔的密度接種于6孔板,待細(xì)胞貼壁后分別加入EGCG單體溶液,使EGCG單體終濃度為10μg/ml、40μg/ml、80μ

4、g/ml,繼續(xù)培養(yǎng)48h,用流式細(xì)胞儀Annexin V-FITC/PI法檢測EGCG單體溶液對(duì)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞凋亡的影響。 2.將對(duì)數(shù)生長期的人肝癌SMMC-7721細(xì)胞密度調(diào)整為1.5×107/ml,以每鼠0.2ml接種于裸鼠腋窩皮下。待皮下移植瘤形成后,將裸鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,每天分別給予EGCG單體溶液50mg/kg只灌胃和生理鹽水灌胃,3周后瘤塊離體稱重。按公式抑瘤率=(1-實(shí)驗(yàn)組瘤重/對(duì)照組瘤重)×

5、100%計(jì)算抑瘤率;用免疫組織化學(xué)法檢測移植瘤中人肝癌SMMC-7721細(xì)胞Ki67的表達(dá)變化;用TUNEL法檢測移植瘤中人肝癌SMMC-7721細(xì)胞凋亡的情況。 結(jié)果: 1.肝癌細(xì)胞體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,在EGCG單體溶液的作用下,人肝癌SMMC-7721細(xì)胞增殖能力明顯受到抑制(P<0.05),并表現(xiàn)出量效和時(shí)效關(guān)系,Ki67表達(dá)水平下調(diào)(P<0.05),流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡明顯增加(P<0.05)。 2.動(dòng)物

6、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組裸鼠經(jīng)EGCG單體溶液灌胃后,皮下移植瘤體積、重量明顯小于對(duì)照組,抑瘤率為30.13%±5.17%,實(shí)驗(yàn)組移植瘤中人肝癌SMMC-7721細(xì)胞Ki67表達(dá)水平下調(diào)(P<0.05),TUNEL法檢測實(shí)驗(yàn)組移植瘤中人肝癌SMMC-7721細(xì)胞凋亡明顯多于對(duì)照組(P<0.05)。 結(jié)論: 1.綠茶提取物EGCG單體對(duì)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞體外增殖具有抑制作用,并可抑制人肝癌SMMC-7721細(xì)胞中

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