鈣敏感受體在大鼠脊髓神經(jīng)元細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷中的表達(dá)變化及其意義.pdf

1、目的：觀察大鼠脊髓神經(jīng)元細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷中鈣敏感受體的表達(dá)變化及其和細(xì)胞凋亡的相關(guān)性。
　　方法：利用原代培養(yǎng)的新生SD大鼠脊髓神經(jīng)元建立缺氧-復(fù)氧損傷（A/R）模型，隨機(jī)分成4組：正常對(duì)照組、缺氧-復(fù)氧組（A/R）、激活組（A/R+GdCl3）、抑制組（A/R+NPS2390）。應(yīng)用Hoechest33258染色觀察各組脊髓神經(jīng)元凋亡。應(yīng)用免疫熒光技術(shù)分析鈣敏感受體及鈣蛋白酶蛋白在脊髓神經(jīng)元的表達(dá)定位。運(yùn)用蛋白質(zhì)印跡技術(shù)檢測(cè)鈣敏

2、感受體、鈣蛋白酶、Bax蛋白在不同處理組中的表達(dá)變化。
　　結(jié)果：1.鈣敏感受體和鈣蛋白酶分布于脊髓神經(jīng)元細(xì)胞的胞膜、胞漿和突起。2.缺氧-復(fù)氧組較對(duì)照組相比， CaSR、鈣蛋白酶、Bax蛋白表達(dá)升高，同時(shí)細(xì)胞凋亡增加。3.較缺氧-復(fù)氧組相比，激活組進(jìn)一步升高了CaSR、鈣蛋白酶、Bax蛋白的表達(dá)；而抑制組上述作用相反。
　　結(jié)論：1.大鼠脊髓神經(jīng)元中存在鈣敏感受體和鈣蛋白酶的表達(dá)，且都分布于脊髓神經(jīng)元細(xì)胞的胞膜、胞漿和突起

3、部。2.缺氧-復(fù)氧可激活CaSR，并且增加脊髓神經(jīng)元的凋亡。應(yīng)用激動(dòng)劑GdCl3可以加重原本存在的缺氧復(fù)氧損傷，增加凋亡；抑制劑NPS2390作用相反。說(shuō)明CaSR參與了缺氧-復(fù)氧誘導(dǎo)的脊髓神經(jīng)元凋亡的過(guò)程。3.CaSR的激動(dòng)或者抑制，都伴隨著鈣蛋白酶表達(dá)的升高或降低，說(shuō)明在缺氧-復(fù)氧誘導(dǎo)的脊髓神經(jīng)元凋亡的過(guò)程中，CaSR與鈣蛋白酶存在正相關(guān)性。4.應(yīng)用抑制劑NPS2390可以明顯抑制細(xì)胞凋亡，減少細(xì)胞缺氧-復(fù)氧損傷。因此，特異性的Ca