葡激酶及其衍生體對非酒精性脂肪肝病治療作用的研究.pdf

1、非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD)是代謝綜合征的一種，指脂肪(主要是甘油三酯和膽固醇)超過肝重的5％，發(fā)生在無過量飲酒史且排除病毒性肝炎、自身免疫性肝病和遺傳性肝病等的人群中，病變主體在肝小葉，肝臟活檢可見肝細胞被脂肪細胞浸潤。脂肪肝的發(fā)病率極高，高達14%-33%。臨床上把NAFLD分為單純性脂肪性肝病(fatty liver disease，NAFL)和脂肪性肝炎(no

2、nalcoholic steatohepatitis，NASH)，其中單純性脂肪性肝病在是良性的；而非酒精性脂肪性肝炎則可繼續(xù)發(fā)展成肝纖維化、肝硬化(hepatocirrhosis)和肝癌(hepatocellular carcinoma，HCC)。
　　 葡激酶(staphylokinase，SAK)是溶原性金黃色葡萄球菌合成的一種單鏈蛋白，由136個氨基酸組成，其中包括45個帶電氨基酸殘基，不含半胱氨酸及二硫鍵，分子量為15

3、.5kDa。目前作為溶栓藥廣泛應用于臨床，其具有纖維蛋白特異性高等特點。我們在研究SAK時發(fā)現(xiàn)其對脂肪代謝可能有影響。本實驗探討了SAK對非酒精性脂肪肝大鼠的治療作用。實驗室前期研究獲得了同時引入RGD序列及水蛭素C末端的低抗原SAK衍生體，對其進行了表達和純化，制備了大量的純度高達95%的衍生體。水蛭素具有調(diào)節(jié)血脂的作用，SAK衍生體具有較強的降脂作用。主要內(nèi)容和實驗結果如下：
　　 1非酒精性脂肪肝大鼠動物模型的建立

4、　　 采用高脂飼料喂養(yǎng)誘發(fā)非酒精性脂肪肝大鼠動物模型。結果顯示，高脂飼料喂養(yǎng)能夠促進大鼠體重和肝指數(shù)增加，血清中膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、丙氨酸氨基轉移酶、天門冬氨酸轉移酶、丙二醛和超氧化物歧化酶明顯升高，病理切片顯示肝臟細胞發(fā)生脂肪變，伴隨著肝組織PPAR-α mRNA表達減少，表明造模成功。
　　 2葡激酶對非酒精脂肪肝的治療
　　 采用方法1誘發(fā)非酒精性脂肪肝大鼠模型，通過采血證實建模成功，然后給予葡激酶治

5、療。結果顯示葡激酶能夠降低大鼠血清中膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、天門冬氨酸轉移酶、丙二醛和超氧化物歧化酶；病理切片顯示肝臟細胞脂肪變減輕，且肝組織PPAR-α mRNA表達增強，表明葡激酶能夠緩解非酒精性脂肪肝癥狀，其作用機制可能與增強肝臟PPAR-α mRNA表達有關。
　　 3葡激酶衍生體對非酒精性脂肪肝的治療
　　 采用方法1誘發(fā)非酒精性脂肪肝大鼠模型，通過采血證實建模成立，然后給予葡激酶衍生體和陽性藥物辛伐他

6、汀治療。結果顯示葡激酶衍生體和辛伐他汀能夠降低大鼠肝臟指數(shù)，并不同程度的降低血清中膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、天門冬氨酸轉移酶、丙二醛和超氧化物歧化酶；病理切片顯示葡激酶衍生體和辛伐他汀治療組肝臟細胞脂肪變減輕，且肝組織PPAR、ADIPOR2 mRNA表達增強，葡激酶衍生體治療組與辛伐他汀治療組間并不存在明顯差異。表明葡激酶衍生體能夠緩解非酒精性脂肪肝癥狀，其作用機制可能是參與PPAR-α、ADIPOR2 mRNA表達。