脂質(zhì)代謝相關內(nèi)外因素的臨床和基礎研究——氣候和TSH.pdf

1、本文主要從以下幾個部分展開論述：
　　第一部分：氣候因素對中國人群血脂水平影響的5年縱向研究
　　目的:
　　研究常見幾種氣候因素對血脂水平的影響和作用，揭示導致血脂水平年節(jié)律變化的機制。
　　方法:
　　利用中國濟南47270位受試者連續(xù)5年的健康查體數(shù)據(jù)進行縱向研究。濟南的氣候是典型的溫帶大陸性季風氣候，冬夏溫差非常顯著（超過30攝氏度），很適合研究血脂水平的季節(jié)變化。
　　結(jié)果:
　　經(jīng)校

2、正經(jīng)典血脂相關的危險因素之后，如年齡，性別，飲食，運動，血壓，體重，身體質(zhì)量指數(shù)，血糖，谷丙轉(zhuǎn)氨酶和肌酸酐等，顯示氣溫仍是影響血脂水平的主要因素和獨立危險因素。對男性而言，氣溫每升高10℃，血漿總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(HDL-C)水平分別顯著減少0.35、0.18和0.06 mmol/l，而血漿總甘油三酯(TG)水平顯著增加0.12mmol/l。對女性而言，氣溫每升高10℃，血漿總膽固醇(TC)、高密

3、度脂蛋白（HDL-C）顯著減少0.73和0.32 mmol/l，低密度脂蛋白(LDL-C)顯著增加0.26 mmol/l，而總甘油三酯(TG)沒有顯著變化。
　　結(jié)論:
　　除了年齡、性別等其他經(jīng)典危險因素之外，氣溫也是影響血脂水平變化的一個非常重要的獨立危險因素。年度氣溫波動可能是導致血脂季節(jié)變化的重要機制。
　　第二部分：TSHR敲除小鼠肝臟蛋白質(zhì)組學研究
　　目的:
　　發(fā)現(xiàn)在TSH在肝臟細胞功能調(diào)控

4、，特別是脂質(zhì)代謝中涉及的調(diào)控網(wǎng)絡和關鍵節(jié)點蛋白，為研究TSH在肝臟通過何種途徑和機制調(diào)控脂代謝，并進而影響參與血脂水平的研究提供有價值的研究線索和方向。
　　方法:
　　小鼠肝臟蛋白質(zhì)樣品經(jīng)蛋白裂解、蛋白濃度測定、Itraq試劑標記、蛋白酶解、高pH反相色譜分離及Nano LC-MS/MS分析，獲取的串聯(lián)質(zhì)譜數(shù)據(jù)通過Proteome Discoverer(Version1.4)軟件搜索數(shù)據(jù)庫進行蛋白質(zhì)鑒定，再運用蛋白質(zhì)相對定

5、量方法尋找肝臟組織差異表達蛋白;然后對差異蛋白質(zhì)進行GO(gene ontology)、KEGG代謝通路等生物信息學分析，并利用BIND，BIOGRID，DIP，INTACT andHPRD等分子相互作用數(shù)據(jù)庫，借助于Cytoscape軟件構(gòu)建并分析蛋白相互作用網(wǎng)絡，找出中心調(diào)控蛋白。
　　結(jié)果:
　　共鑒定出5173個蛋白質(zhì)，其中5168個蛋白質(zhì)具有定量信息，與對照組相比，TSHR敲除小鼠上調(diào)的蛋白質(zhì)109個，下調(diào)的蛋白質(zhì)

6、70個;GO-MF與GO-BP的富集分析結(jié)果表明TSHR基因敲除后表達出現(xiàn)顯著變化的蛋白的功能與羧酸代謝、脂代謝和甾體激素代謝等功能顯著相關，富集到上述功能和通路的調(diào)變蛋白數(shù)量多、顯著性強。這提示TSHR在肝臟中的功能主要與上述生物學過程關系密切。蛋白相互作用網(wǎng)絡分析的結(jié)果也提示類似的結(jié)果，這些TSHR敲除后顯著變化的蛋白質(zhì)相互之間能夠形成復雜的調(diào)控網(wǎng)絡，這一網(wǎng)絡中與脂代謝、膽固醇代謝和甾體激素代謝相關的基因是網(wǎng)絡的關鍵節(jié)點，并形成重要