化療后腸功能紊亂的臨床和基礎(chǔ)研究.pdf

1、目的：
　　 研究惡性腫瘤患者經(jīng)過多周期化療后腸道運(yùn)動(dòng)及感覺功能的變化，明確化療與腸功能紊亂之間是否存在關(guān)聯(lián)，初步探討化療后腸功能紊亂的可能機(jī)制。進(jìn)而以5-Fu靜脈化療大鼠為模型，研究結(jié)腸組織學(xué)、炎癥標(biāo)記物、腸屏障功能及腸神經(jīng)系統(tǒng)的變化，進(jìn)一步探討化療后腸功能紊亂的詳細(xì)發(fā)病機(jī)制。
　　 方法
　　 1.化療后腸功能紊亂的臨床初探
　　 1.1將46例多周期化療后的非消化系統(tǒng)惡性腫瘤患者按照主要臨床癥狀分為

2、兩組：腹瀉組26例，便秘組20例；以健康志愿者12例作為對(duì)照組。
　　 1.2以結(jié)腸傳輸試驗(yàn)測(cè)定腹瀉組和便秘組的結(jié)腸運(yùn)動(dòng)功能參數(shù)：結(jié)腸轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間(CTT)、分段結(jié)腸轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間(RCTT、LCTT、SRTT)。(3)以肛管直腸測(cè)壓法測(cè)定腹瀉組和便秘組的肛管直腸運(yùn)動(dòng)及感覺功能參數(shù)：直腸靜息壓(RRP)、肛管靜息壓(ARP)、最大縮棒壓(MSP)、松弛壓、引起直腸肛管抑制反射(RAIR)時(shí)的最小直腸擴(kuò)張容量、初始感覺閾值(FSV)、排便感

3、覺閾值(DSV)、疼痛感覺閾值(PSV)。
　　 2.5-Fu靜脈化療大鼠腸功能紊亂的基礎(chǔ)研究
　　 2.1模型制備：120只大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組（A、B、C組），化療組（D、E、F組），對(duì)照組各10只，化療組各30只?；熃M尾靜脈注射5-Fu20mg/kg，對(duì)照組注射等量生理鹽水。第7天處死A、D組大鼠各一半，取距盲腸結(jié)腸交界5cm處結(jié)腸待測(cè)。第21天同樣處理B、E組大鼠，第42天同樣處理C、F組大鼠。
　　 2

4、.2觀察指標(biāo)：
　　 2.2.1一般情況：每日觀察大鼠的攝食、排便和活動(dòng)情況。
　　 2.2.2體重：實(shí)驗(yàn)前、第7、21、42日測(cè)量空腹體重。
　　 2.2.3結(jié)腸標(biāo)本的大體觀察及炎癥評(píng)分。
　　 2.2.4結(jié)腸黏膜的鏡下觀測(cè)：常規(guī)HE染色后光鏡下觀察其形態(tài)學(xué)變化，并測(cè)量其黏膜厚度。
　　 2.2.5結(jié)腸標(biāo)本的MPO測(cè)定：采用分光光度法測(cè)定炎癥腸段全層組織的MPO。
　　 2.2.6腸神經(jīng)

5、系統(tǒng)損害的測(cè)定：采用放射免疫法分別測(cè)定各組大鼠結(jié)腸黏膜P物質(zhì)(SP)和血管活性腸肽(VIP)含量。
　　 2.2.7結(jié)腸微血管通透性的測(cè)定：采用改良EB滲出法測(cè)定并計(jì)算結(jié)腸EB含量。
　　 結(jié)果
　　 1.化療后腸功能紊亂的臨床初探
　　 1.1結(jié)腸傳輸試驗(yàn)：腹瀉組的CTT和分段CTT均顯著低于對(duì)照組組(P<0.05）；便秘組的CTT和分段CTT均顯著高于對(duì)照組(P<0.05）。腹瀉組48h均排出80％以

6、上的標(biāo)志物，對(duì)照組72h均排出80％以上的標(biāo)志物，便秘組中72hCTT正常者有2例(10.O％)。
　　 1.2肛管直腸測(cè)壓：腹瀉組和便秘組的RRP、ARP、MSP、松弛壓與對(duì)照組相比無顯著性差異（P>0.05）：腹瀉組的FSV、DSV、PSV、引起RAIR時(shí)最小直腸擴(kuò)張容量均顯著低于對(duì)照組(P<0.05）；便秘組的FSV、DSV、PSV、引起RAIR時(shí)最小直腸擴(kuò)張容量均顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。
　　 2.5-F

7、u靜脈化療大鼠胃腸功能紊亂的基礎(chǔ)研究
　　 2.1一般情況：化療組大鼠靜脈注射5-Fu當(dāng)天或第二天開始出現(xiàn)攝食明顯減少、排便異常、少動(dòng)閉眼、精神萎靡、蜷曲拱背、形體消瘦。第21天后上述情況逐漸好轉(zhuǎn)，至第42天已與對(duì)照組無異。對(duì)照組在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中攝食、排便及活動(dòng)正常，生長良好，未見明顯異常變化。
　　 2.2體重：第7天，化療組大鼠體重明顯降低(P<0.05)；第21天，化療組大鼠體重已開始恢復(fù)，但與對(duì)照組相比仍有顯著性

8、差異(P<0.05）；第42天，化療組大鼠體重增加較多，與化療前相比已無明顯差異（P>0.05），但與體重穩(wěn)定增長的對(duì)照組相比仍有顯著性差異[P<0.05）。
　　 2.3結(jié)腸標(biāo)本的大體觀察及炎癥評(píng)分：第7天，化療組大鼠結(jié)腸大體標(biāo)本可見明顯的急性炎癥，黏膜明顯糜爛、粘連、充血及出血點(diǎn)；第21天，化療組標(biāo)本急性炎癥已消退，黏膜有所增厚、蒼白；第42天，化療組標(biāo)本外觀正常，與正常腸道無明顯界限。同期處死的對(duì)照組大鼠，結(jié)腸標(biāo)本未見炎癥

9、表現(xiàn)。
　　 2.4結(jié)腸黏膜的鏡下觀測(cè)：第7天，光鏡下化療組大鼠結(jié)腸標(biāo)本黏膜厚度與對(duì)照組相比顯著變薄（P<0.05），黏膜下見灶狀炎癥，有較多中性粒細(xì)胞浸潤；第21天，黏膜厚度較前有所增厚，但仍顯著低于對(duì)照組（P<0.05），黏膜下炎癥基本消退，少量中性粒細(xì)胞浸潤，淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞浸潤明顯增加；第42天，黏膜厚度與對(duì)照組相比已無顯著差異（P>0.05），結(jié)腸結(jié)構(gòu)基本恢復(fù)正常，無明顯炎癥表現(xiàn)，僅見一定量的黏膜下淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞浸潤

10、。對(duì)照組大鼠結(jié)腸標(biāo)本在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中未見明顯異常改變。
　　 2.5結(jié)腸標(biāo)本的MPO測(cè)定：第7天，化療組結(jié)腸組織的MPO活性顯著增高(P<0.05)；第21天，化療組結(jié)腸組織的MPO活性顯著增高(P<0.05)；第42天，化療組結(jié)腸組織的MPO活性與對(duì)照組相比已無顯著差異（P>0.05）。
　　 2.6腸神經(jīng)系統(tǒng)損害的測(cè)定：第7天，化療組大鼠結(jié)腸黏膜的SP和VIP含量均顯著升高(P<0.05)；第21天，化療組大鼠結(jié)腸黏

11、膜的SP和VIP含量有所降低，但仍明顯高于對(duì)照組(P　　 2.7結(jié)腸微血管通透性的測(cè)定：第7天，化療組大鼠結(jié)腸壁EB含量明顯高于對(duì)照組（P<0.05）；第21天，化療組大鼠結(jié)腸壁EB含量開始降低，但仍明顯高于對(duì)照組(P<0.05)：第42天，化療組大鼠結(jié)腸壁EB含量進(jìn)一步降低，但仍高于對(duì)照組（P<0.05）。
　　

12、 結(jié)論
　　 1.多周期化療后的非消化系統(tǒng)惡性腫瘤患者，存在結(jié)腸運(yùn)動(dòng)功能、肛管直腸運(yùn)動(dòng)及感覺功能異常，化療與腸功能紊亂之間存在關(guān)聯(lián)?；熀竽c功能紊亂的發(fā)病機(jī)制主要是腸動(dòng)力異常及內(nèi)臟高敏感性，以內(nèi)臟高敏感性更為關(guān)鍵。
　　 2.5-Fu靜脈化療后大鼠結(jié)腸急性炎癥消退后，仍然存在結(jié)腸黏膜SP和VIP的持續(xù)升高以及結(jié)腸微血管通透性的持續(xù)增高，表明了神經(jīng)免疫內(nèi)分泌網(wǎng)絡(luò)失衡和腸屏障功能減退的持續(xù)存在，這可能引起并維持了腸道持續(xù)的