復(fù)方黃芩苷對(duì)實(shí)驗(yàn)性糖尿病周?chē)窠?jīng)病變保護(hù)作用研究.pdf

1、研究目的：本課題擬通過(guò)不同比例的黃芩苷與燈盞花素進(jìn)行增效減毒、科學(xué)配伍，觀察其對(duì)鏈脲佐菌素(Steptozocin,STZ)誘導(dǎo)的糖尿病大鼠動(dòng)物模型周?chē)窠?jīng)的保護(hù)作用并探討其可能機(jī)制，為糖尿病周?chē)窠?jīng)病變(Diabetic peripheral neuropathy,DPN)的預(yù)防提供一種安全、有效且廉價(jià)的中藥提取物。 研究方法： 將36只200～250g正常雄性Wistar大鼠一次性腹腔注射STZ誘導(dǎo)成糖尿病后，隨機(jī)分

2、為6組，分別為糖尿病對(duì)照組(DM)8只、黃芩苷治療組(Ba，100mg／kg)8只、燈盞花素治療組(Br,100mg／kg)7只、黃芩苷+燈盞花素(1：1)治療組(Ba+Br(1：1)，100mg／kg+100mg／kg)6只、黃芩苷+燈盞花素(2：1)治療組(Ba+Br(2：1)，100mg／kg+50mg／kg)7只。另外取7只年齡、體重匹配的正常雄性Wistar大鼠作為正常對(duì)照組。各治療組按以上劑量每日上午灌胃給藥，正常對(duì)照組和糖

3、尿病對(duì)照組以等量的雙蒸水灌胃。給藥12W后，對(duì)大鼠進(jìn)行疼痛行為學(xué)測(cè)試測(cè)定50％的機(jī)械刺激撤足閾值(PWT)和熱刺激撤足潛伏期(PWTL)，隨后測(cè)定坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度，然后處死大鼠，取血、坐骨神經(jīng)、背根神經(jīng)節(jié)、胰腺標(biāo)本，測(cè)定血糖，坐骨神經(jīng)組織超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)的含量；通過(guò)免疫組織化學(xué)的方法測(cè)定坐骨神經(jīng)和背根神經(jīng)節(jié)組織VEGF的表達(dá)；光學(xué)顯微鏡下觀察各組胰腺、坐骨神經(jīng)和背根神經(jīng)節(jié)組織病理學(xué)改變。研究結(jié)果：

4、 12W后，與正常對(duì)照組大鼠比較，糖尿病組大鼠的血糖明顯升高(p<0.01)，體重明顯降低(p<0.01)，坐骨神經(jīng)組織MDA含量明顯升高(p<0.01)，坐骨神經(jīng)組織SOD活性，坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度、50％的機(jī)械刺激撤足閾值(PWT)明顯降低(p<0.01)，而熱刺激撤足潛伏期(PWTL)較正常對(duì)照組明顯延長(zhǎng)(p<0.01)；光學(xué)顯微鏡下糖尿病大鼠可觀察神經(jīng)組織可見(jiàn)神經(jīng)纖維排列紊亂，分布不均勻，軸突萎縮變性，髓鞘脫失。VEGF免疫組織化學(xué)

5、結(jié)果顯示糖尿病大鼠坐骨神經(jīng)和背根神經(jīng)在軸突和髓鞘，節(jié)細(xì)胞胞漿處著色較正常對(duì)照組明顯稀薄。圖象分析后得到的VEGF積分光密度提示糖尿病組較正常對(duì)照組有減淡。 各藥物治療組大鼠血糖、體重與糖尿病對(duì)照組相比無(wú)明顯差異(p>0.05)。而坐骨神經(jīng)SOD的活性均有明顯升高，差異有顯著性(Br、Ba組p<0.05，Ba+Br(1：1)、Ba+Br(2：1)p<0.01)，且升高幅度Ba+Br(1：1)>Ba+Br(2：1)>：Br>Ba；坐

6、骨神經(jīng)MDA的含量均有明顯降低，差異有顯著性(Br、Ba組p<0.05，Ba+Br(1：1)、Ba+Br(2：1)p<0.01)，且降低幅度Ba+Br(1：1)>Ba+Br(2：1)>Br>Ba；各藥物治療組大鼠坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度與糖尿病對(duì)照組相比均有升高，且升高幅度為Ba+Br(1：1)>Ba+Br(2：1)>Br>Ba；各藥物治療組大鼠PWT與糖尿病對(duì)照組相比均明顯升高，差異有顯著性(p<0.05)，且升高幅度Ba+Br(1：1)>B

7、a+Br(2：1)>Br>Ba；而各藥物治療組大鼠PWTL均明顯降低，差異有顯著性(p<0.05)，且降低幅度Ba+Br(1：1)>Ba+Br(2：1)>Ba>Br；光鏡下各藥物組見(jiàn)神經(jīng)纖維排列紊亂，分布不均勻，軸突萎縮變性，髓鞘脫失較糖尿病組有所減輕；各藥物組神經(jīng)組織VEGF的免疫組織化學(xué)表達(dá)均較糖尿病組有所增加。圖象分析后得到的VEGF積分光密度也提示各藥物組VEGF的表達(dá)與糖尿病組比較均有明顯上升(P<0.05)．上升順序依次為B