Ang1、Ang2和Tie2在血管內皮細胞和體外三維培養(yǎng)血管樣結構中的表達及意義.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的： 構建體外血管生成的三維培養(yǎng)模型，研究體內臍靜脈內皮細胞(HVUECs)、體外培養(yǎng)的HVUECs和體外三維培養(yǎng)的血管樣結構中促血管生成素1、2及其受體(Ang1、2及Tie2)的表達水平，旨在探討其在體外血管生成中的作用，為將來進一步在體外進行抑制血管生成的實驗研究打下基礎。 方法： 以酶消化法獲得HVUECs，經免疫細胞化學染色技術鑒定，采用夾心培養(yǎng)法構建體外血管生成的三維培養(yǎng)模型，獲得三維血管樣結構。采

2、用逆轉錄一聚合酶鏈式反應(RT-PCR)的方法分別檢測10例體內HVUECs、體外培養(yǎng)的HVUECs及體外三維培養(yǎng)模型的血管樣結構中Angl、Ang2及Tie2信使核糖核酸(mRNA)的表達水平；同時采用免疫組化法和免疫細胞化學染色法檢測10例體內HVUECs、體外培養(yǎng)的HVUECs中Angl、Ang2及Tie2蛋白的表達水平。 結果： 1、以酶消化法可獲得以HVUECs為主的混合細胞懸液，經反復貼壁法分離純化內皮細胞，

3、采用免疫細胞化學染色技術對內皮細胞進行鑒定并確定了所純化的細胞為HVUECs。采用夾心培養(yǎng)法成功構建了體外血管生成的三維培養(yǎng)模型，獲得三維血管樣結構。 2、體外三維培養(yǎng)模型中Ang2mRNA、Tie2mRNA表達水平均高于體內外HVUECs組(P<0.05)；體內外HVUECs組間Ang2mRNA、Tie2mRNA表達水平相比差異無顯著性意義(P>0.05)。 3、體內外HVUECs及體外三維培養(yǎng)模型中AnglmRNA表

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