缺氧條件下體外培養(yǎng)血管內(nèi)皮細(xì)胞AQP1表達(dá)的變化.pdf

1、目的：①研究缺氧對體外培養(yǎng)血管內(nèi)皮細(xì)胞AQP1表達(dá)的影響；②初步探討缺氧對血管內(nèi)皮細(xì)胞AQP1表達(dá)影響的機(jī)制；③為進(jìn)一步動物實驗提供實驗依據(jù)。 方法：采用臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株，復(fù)蘇傳代后計數(shù)稀釋，按1.0×10<'5>/Well的密度接種于數(shù)塊6孔培養(yǎng)板中，細(xì)胞長滿融合后分組：常氧組(5％CO<,2>+95％空氣)，缺氧組(1％O<,2>+5％CO<,2>+94％N<,2>)，觀察3h，6h，12h，24h，應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)半定量檢

2、測AOP1蛋白水平的表達(dá)以及Realtime-PCR法檢測AOPlmRNA的表達(dá)。 結(jié)果：常氧情況下血管內(nèi)皮細(xì)胞有較弱的AQP1的表達(dá)；缺氧環(huán)境中內(nèi)皮細(xì)胞AQP1蛋白表達(dá)較常氧增加，缺氧3h時AQP1蛋白質(zhì)表達(dá)量增加(Z=-2.722，P<0.05)，達(dá)常氧對照組的1.4倍；以缺氧6h組AQP1蛋白表達(dá)升高最顯著(Z=-2.882，P<0.05)，達(dá)對照組的2.6倍；缺氧12h時蛋白達(dá)對照組1.5倍(Z=-2.562，P<0.0

3、5)；缺氧24h時與對照組無明顯差別(Z=-1.6，p>0.05)。缺氧6h組與常氧對照組相比，其AOPlmRNA表達(dá)有非常明顯的增加(p=0.016，P<0.05)，達(dá)對照組6.9倍；缺氧12h組達(dá)常氧對照組3.5倍(P=0.030，P<0.05)，缺氧3h組(P=0.723，>0.05)和缺氧24h組與常氧對照組無明顯差別(P=0.858，>0.05)。 結(jié)論：缺氧在蛋白和轉(zhuǎn)錄水平對臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞．AQP1的表達(dá)有調(diào)節(jié)作用。