肝復(fù)康對肝纖維化大鼠肝組織A-raf、ERK2表達(dá)的影響.pdf

1、目的：通過研究復(fù)方中藥肝復(fù)康對大鼠纖維化肝組織A-raf、細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶（extracellular signal-regulated kinase，ERK）表達(dá)的影響，探討其在A-raf、ERK介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路上治療肝纖維化的機(jī)制。 方法：健康SD大鼠，體重180-220克，隨機(jī)分為正常對照組（C）、模型組（M）、模型對照組（MC）、低劑量治療組（LT）、中劑量治療組（MT）、高劑量治療組（HT）及中藥中劑量預(yù)防組（P）

2、。皮下注射10%CCl4十二周制備肝纖維化模型，在第九周時給予中藥肝復(fù)康治療至第二十周。中劑量預(yù)防組在造模的同時給予中藥中劑量治療。治療結(jié)束后處理動物。通過測定血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alanine aminotransferase，ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（aspartate Aminotransferase，AST）、白蛋白和總蛋白的含量及光鏡下觀察肝組織HE染色來反映肝纖維化的程度，免疫組織化學(xué)方法檢測肝組織中ERK2的表達(dá)及分布，逆轉(zhuǎn)錄聚

3、合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）方法檢測A-raf、ERK2的表達(dá)。 結(jié)果： （1）血清學(xué)指標(biāo)：第20周時，中劑量組大鼠血清ALT為37.62±8.941U，AST為50.02±13.68 IU，白蛋白為39.28±2.38 g/L，球蛋白為25.16±3.45g/L，白球比為1.59±0.38；模型組大鼠血清ALT為76.53±10.82IU，AST為85.64±10.62IU，白蛋白為28.46±5.42 g/L，球蛋白

4、為32.53±3.94g/L，白球比為0.96±0.29。 （2）肝組織病理學(xué)變化：HE染色顯示，模型組大鼠肝組織中有較多假小葉形成，中劑量治療組大鼠肝組織中假小葉形成較模型組明顯減輕。免疫組織化學(xué)染色顯示，模型組ERK2的表達(dá)較正常組明顯增強(qiáng)，中劑量治療組ERK2的表達(dá)較模型組明顯減輕（P<0.01）。 （3）肝組織A-raf和ERK2mRNA的表達(dá)：在逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)中，模型組的A-raf、ERK2的表達(dá)較正常組

5、明顯上調(diào)（P<0.01），低、中、高劑量組A-raf、ERK2的表達(dá)較模型組有所下調(diào)，其中以中劑量組下調(diào)最為明顯（P<0.01）。中劑量預(yù)防組A-raf、ERK2的表達(dá)與模型組無明顯差異。 結(jié)論： （1）ERK介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路可能在肝纖維化的發(fā)病中起重要的作用。 （2）肝復(fù)康對肝纖維化有明確的治療作用，其抗纖維化的作用機(jī)制可能與ERK介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路有關(guān)。 （3）肝復(fù)康中劑量治療組的治療效果較好，是合