生物轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)方法的研究.pdf

1、轉(zhuǎn)基因作物由于具有抗蟲害雜草等優(yōu)良的品質(zhì),目前在很多國(guó)家都已大規(guī)模商品化生產(chǎn).但隨著對(duì)轉(zhuǎn)基因食品安全性認(rèn)識(shí)的不斷深入,各國(guó)在積極發(fā)展轉(zhuǎn)基因技術(shù)的同時(shí),加強(qiáng)了對(duì)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的監(jiān)控和管理.中國(guó)政府和世界很多國(guó)家都采用了對(duì)轉(zhuǎn)基因作物進(jìn)行標(biāo)識(shí)的制度,因此積極開發(fā)快速檢測(cè)轉(zhuǎn)基因成分的試劑盒具有重大的實(shí)際意義.該研究旨在研究形成最終產(chǎn)品-方便快捷的轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)試劑盒過(guò)程的關(guān)鍵技術(shù)和科學(xué)問題.根據(jù)轉(zhuǎn)基因抗草甘膦作物中普遍存在的保守序列,設(shè)計(jì)合成-對(duì)引

2、物,對(duì)轉(zhuǎn)基因抗草甘膦大豆進(jìn)行PCR擴(kuò)增.將獲得的片段制作成探針,并對(duì)該探針在雜交時(shí)的結(jié)合比率進(jìn)行初步研究,為其在檢測(cè)試劑盒中的應(yīng)用奠定基礎(chǔ).通過(guò)磁性微粒連接Bt Cry 1Ac晶體蛋白抗體,研制成Bt CrylAc晶體蛋白放射免疫檢測(cè)試劑盒,不僅比常規(guī)檢測(cè)縮短了反應(yīng)時(shí)間,也簡(jiǎn)化了操作步驟,具有定量、快速、靈敏的特點(diǎn).建立了兩株分泌抗Bt Cry 1Ac晶體蛋白單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株,其染色體數(shù)平均為96,分泌抗體穩(wěn)定.抗體亞型為IgG