乳酸桿菌對5-Fu腹腔注射致腸屏障功能障礙的保護作用.pdf

1、目的：1、觀察5-Fu腹腔注射對SD大鼠小腸結(jié)構(gòu)及腸屏障功能的影響，比較一次性給藥和分次連續(xù)給藥方案對小腸粘膜的損傷作用；
　　 2、探討乳酸桿菌對5-Fu引起的大鼠腸屏障功能損傷的保護作用及機制。
　　 方法：
　　 SD大鼠48只隨機分為6組，每組8只。對照組(A)、小劑量5-Fu組(B)、小劑量5-Fu聯(lián)合乳酸桿菌組(C);對照組(D)、大劑量5-Fu組(E)、大劑量5-Fu聯(lián)合乳酸桿菌組(F)。B組、C組

2、每天腹腔注射5-Fu50mg/kg D1-5天，A組注射等比例生理鹽水；C組每天予乳酸桿菌溶解液1ml灌胃(含乳酸桿菌1×109cfu/ml)D1-7天，A組、B組等容積生理鹽水灌胃。E組、F組腹腔注射5-Fu250mg/kg D1天，D組注射等容積生理鹽水；F組每天予乳酸桿菌溶解液1ml灌胃(含乳酸桿菌1×109cfu/ml)D1-7天，D組、E組等容積生理鹽水灌胃。實驗中觀察動物體重變化并對腹瀉情況進行評分。于實驗第8天處死每組動物

3、，活體取小腸組織觀察腸粘膜病理學變化和超微結(jié)構(gòu)，腹主動脈取血測定血漿內(nèi)毒素，采用免疫組化方法測定小腸粘膜NF-κB表達，BCA法測定小腸黏膜蛋白質(zhì)含量。
　　 結(jié)果：
　　 1、各實驗組大鼠體重變化
　　 實驗過程中對照組A對照組D體重進行性增加，增加量差別無統(tǒng)計學意義。B組、C組及E組各有一只大鼠與實驗中死亡。實驗后第8天B組、C組、E組、F組體重明顯下降，與對照組有顯著性差異P＜0.05。組間比較，F(xiàn)組體重下

4、降小于另外三組，差異有統(tǒng)計學意義P＜0.05。
　　 2、各實驗組大鼠腹瀉情況
　　 實驗72小時，E組腹瀉程度最嚴重，C組好于B組，F(xiàn)組好于E組，B組好于E組，差異有統(tǒng)計學意義，P＜0.01；F組C組之間無差別。實驗第8天，B組腹瀉程度最嚴重，C組好于B組，F(xiàn)組好于E組，E組好于B組，F(xiàn)組好于C組，差異有統(tǒng)計學意義，P＜0.01。
　　 3、血漿內(nèi)毒素水平測定
　　 實驗第8天，兩對照組間內(nèi)毒素比較，D

5、組、A組差異無統(tǒng)計學意義；B、C與E、F組血漿內(nèi)毒素均明顯升高，其中B組＞C組，E組＞F組，各組間比較差異有顯著統(tǒng)計學意義(P＜0.01)；小劑量5-Fu連續(xù)注射組血漿內(nèi)毒素水平均高于大劑量5-Fu一次性注射組，兩組間比較差異有顯著統(tǒng)計學意義(P＜0.01)；未予乳酸桿菌灌胃組血漿內(nèi)毒素水平均高于乳酸桿菌灌胃組，兩組間比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。
　　 4、各實驗組大鼠病理評分
　　 實驗第8天，B組病理評分最

6、差，C組好于B組，F(xiàn)組好于E組，E組好于B組，F(xiàn)組好于C組，差異有統(tǒng)計學意義，P＜0.01。
　　 5、小腸黏膜超微結(jié)構(gòu)觀察
　　 實驗第8天，對照組超微結(jié)構(gòu)正常。B組、C組、E組、F組有不同程度超微結(jié)構(gòu)改變。體現(xiàn)在小腸細胞微絨毛、細胞間緊密連接及細胞間隙的改變。F組好于E組，兩組好于C組。B組變化最重。
　　 6、各實驗組大鼠腸黏膜NF-κB表達情況
　　 實驗第8天，B、C與E、F組NF-κB的表達及

7、含量均高于A、D組，其中E組高于F組，B組高于E組，C組高于F組，差異有統(tǒng)計學意義，P＜0.05;B組高于C組，但差異沒有統(tǒng)計學意義，P＞0.05。
　　 7、小腸黏膜蛋白質(zhì)含量
　　 實驗第8天，A組的腸黏膜蛋白質(zhì)含量＞D組，但差異無統(tǒng)計學意義;B、C與E、F組均低于A、D組;C組＞B組，F(xiàn)組＞E組，除F組外，其余3組與各自對照組比較差異有統(tǒng)計學意義，P＜0.05;F組與D組比較，差異無統(tǒng)計學意義；B、C組均低于于E、

8、F組，P＜0.05;B、E組均低于于C、F組，P＜0.01。
　　 結(jié)論：
　　 1、通過腹腔注射5-Fu造成大鼠腸黏膜屏障功能受損，這一過程與NF-κB被激活產(chǎn)生炎癥反應(yīng)，細胞間緊密連接完整性破壞，腸黏膜蛋白質(zhì)丟失，結(jié)果造成內(nèi)毒素血癥有關(guān)。
　　 2、比起大劑量給藥的瞬間激活，腸黏膜上皮細胞中NF-κB被小劑量5-Fu給藥持續(xù)激活所表達的炎癥反應(yīng)更為嚴重。可能持續(xù)激活在體內(nèi)起到擴增炎癥的作用。
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