黑靈芝多糖的免疫調節(jié)活性及其作用機制.pdf

1、黑靈芝是一種廣受關注的藥食兩用真菌,在中國作為傳統(tǒng)藥材和健康食品使用已經(jīng)有幾千年的歷史。多糖被認為是黑靈芝中最主要的活性成分。本論文以從江西贛州地區(qū)黑靈芝中分離純化的黑靈芝多糖PSG-1為研究對象,運用細胞和分子生物學技術,從體內(nèi)和體外水平研究PSG-1的免疫調節(jié)活性,并以巨噬細胞和脾淋巴細胞為靶細胞,深入探討PSG-1免疫調節(jié)活性的作用機制。主要結論歸納如下:
　　一、PSG-1對巨噬細胞具有免疫調節(jié)活性。PSG-1能夠增強小鼠

2、巨噬細胞的吞噬能力,誘導NO、細胞因子(TNF-α和IL-1β)和ROS的生成。
　　二、TLR4是PSG-1激活巨噬細胞的主要受體;來源于NADPH氧化酶的ROS作為PI3K/Akt/MAPK/NF-κB的上游信號通路調節(jié)PSG-1誘導的TNF-α產(chǎn)生,證明PSG-1通過ROS/PI3K/Akt/MAPK/NF-κB信號通路激活巨噬細胞。
　　三、PSG-1對脾淋巴細胞具有免疫調節(jié)活性。PSG-1既能與ConA或LPS協(xié)同

3、促進小鼠脾T、B淋巴細胞增殖,也能直接促進小鼠脾T、B淋巴細胞增殖;PSG-1可顯著提高小鼠脾淋巴細胞CD3+、CD4+、CD19+細胞百分比及CD4+/CD8+的比值;此外,PSG-1還可促進T淋巴細胞分泌Thl型細胞因子IL-2、IFN-γ和Th2型細胞因子IL-4,提高B淋巴細胞Ig分泌水平。
　　四、PSG-1通過激活脾淋巴細胞NO/cGMP、cAMP/PKA、Ca2+/PKC/Calcineurin/NFAT信號轉導通路

4、發(fā)揮免疫調節(jié)活性;TLR4可能是PSG-1作用于脾淋巴細胞的受體。
　　五、PSG-1通過增強腹腔巨噬細胞吞噬能力,提高TNF-α、IL-1β和NO等活性分子的分泌抵抗Cy造成的免疫抑制,可能與增強TLR4表達,激活MAPK、PI3K/Akt和NF-κB通路有關;PSG-1通過增強Cy所致免疫抑制小鼠脾淋巴細胞增殖,提高NK細胞和CTL細胞活性,升高CD4+和CD8+細胞的比例和CD4+/CD8+的比值,從而恢復Cy誘導的免疫抑制

5、,可能與增強TLR4表達,激活NO/cGMP、cAMP/PKA、Ca2+/PKC/Calcineurin通路有關。
　　六、PSG-1恢復Cy所致免疫抑制小鼠的白細胞、紅細胞和血小板數(shù)量降低,提高造血功能;PSG-1恢復Cy所致免疫抑制小鼠血清中細胞因子IL-2、IFN-γ、IL-10,IgA、IgG、IgM和溶血素的水平;此外,PSG-1增強Cy所致免疫抑制小鼠的總抗氧化能力,超氧化物歧化酶、過氧化氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶活力,

6、降低丙二醛含量。
　　七、PSG-1增強荷瘤C3H/HeN小鼠腹腔巨噬細胞吞噬能力,提高ROS的生成,激活MAPK、PI3K/Akt和NF-κB通路,此外PSG-1還能夠提高荷瘤C3H/HeN小鼠脾淋巴細胞增殖水平,增強NK細胞活性,升高細胞因子IL-2、TNF-α、IFN-γ、IL-12分泌,調控細胞亞群,表明PSG-1發(fā)揮抗腫瘤活性與增強腹腔巨噬細胞和脾淋巴細胞免疫功能相關。但PSG-1對荷瘤C3H/HeJ小鼠幾乎無抗瘤作用,